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亨廷顿蛋白相关蛋白1基因对小鼠成纤维细胞增殖的影响

发布时间:2021-03-20 00:57
  目的研究亨廷顿蛋白相关蛋白1(Huntingtin-associated protein 1,Hap1)基因对成纤维细胞增殖的影响。方法体外分离培养获得Hap1基因敲除(Hap1-/-)的原代成纤维细胞,鉴定后采用EdU增殖实验、细胞周期(流式细胞术)检测验证Hap1敲除后成纤维细胞增殖的改变;将野生型和Hap1-/-成纤维细胞送转录组测序筛选增殖相关基因,实时荧光定量PCR(qPCR)验证相关基因表达水平的改变。对小鼠进行皮肤损伤造模检测Hap1敲减(Hap1+/-)小鼠皮肤损伤修复情况;PCNA免疫组化染色检测损伤修复过程中成纤维细胞的增殖水平。结果成功培养原代Hap1-/-成纤维细胞;与野生型成纤维细胞相比,Hap1-/-成纤维细胞EdU阳性比例减少,进入S期的细胞比例减少;原代成纤维细胞转录组测序筛选出Cdc25C、E2f7、E2f8和Ccl5四个差异表达的增殖相关基因,qPCR验证发现E2f7在Hap1敲除后表达增多。小鼠皮肤损伤结果显示,Hap1+/-

【文章来源】:四川大学学报(医学版). 2019,50(03)北大核心

【文章页数】:7 页

【部分图文】:

亨廷顿蛋白相关蛋白1基因对小鼠成纤维细胞增殖的影响


图4小鼠皮肤损伤面积测量Fi4Chanesinskinlesionareasinmice


本文编号:3090418

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