调控S1P1受体信号通路对糖氧剥后星形胶质细胞增殖的影响

发布时间：2017-04-21 10:10

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【摘要】：目的:观察鞘氨醇1-磷酸1型受体(The sphingosine 1-phosphate receptor,S1P1R)抑制剂W146对糖氧剥夺(Oxygen-glucose deprivation,OGD)后星形胶质细胞增殖能力的影响。方法:取出生后3天内SD(Sprague-Dawley)乳鼠大脑皮层组织进行星形胶质细胞原代培养。取第三代细胞予以免疫荧光鉴定其纯度后进行后续试验步骤。采用免疫荧光双标法检测S1P1R在星形胶质细胞上的表达。将接种于培养皿中的细胞随机分为3组:CONTROL组、OGD/R组以及OGD/R+W146组。OGD处理细胞2小时模拟缺氧环境建立星形胶质细胞缺氧模型,恢复糖氧供应时CONTROL组细胞予以普通培养基、OGD/R组细胞予以培养基+等浓度药物溶剂(无水乙醇)、OGD/R+W146组细胞予以培养基+W146(10u M)。恢复糖氧供应后3h、6h、12h以及24h时间点行EDU、流式细胞术检测处于增殖期(S期)细胞比率;恢复糖氧供应后12h、24h、48h、72h时点,行噻唑蓝(MTT)检测星形胶质细胞增殖活性;蛋白免疫印迹法检测S1P1R蛋白表达水平。结果:S1P1R在星形胶质细胞上有表达。OGD后星形胶质细胞增殖能力升高:与CONTROL组相比,OGD组细胞增殖活性显著增加(P0.05),处于S期细胞比率明显增加,S1P1R蛋白表达水平上调,有统计学意义(6h和12h,P0.05)。与OGD/R组相比,W146干预后可抑制OGD/R组星形胶质细胞增殖能力,细胞增殖活性下降,处于S期的细胞比率明显降低(6h和12h,P0.05)。W146干预后OGD/R+W146组S1P1R蛋白较OGD/R组下降(6h和12h,P0.05)。结论:W146抑制OGD后星形胶质细胞的增殖。
【关键词】：S1P1R W146 OGD/R 星形胶质细胞 增殖
【学位授予单位】：南华大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R329.2
【目录】：

• 摘要4-6
• Abstract6-8
• 英汉缩略词对照表8-10
• 第1章 前言10-14
• 第2章 实验仪器和试剂14-16
• 第3章 实验方法16-24
• 第4章 实验结果24-32
• 第5章 讨论32-36
• 第6章 结论36-38
• 参考文献38-42
• 文献综述42-48
• 参考文献46-48
• 作者攻读学位期间的科研成果48-50
• 致谢50

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本文编号：320097