日本血吸虫重组SjTsp2/Sj29ku蛋白疫苗对小鼠免疫效果的研究

发布时间：2021-05-22 17:47

　　目的探讨日本血吸虫重组Tsp2/Sj29 ku表膜蛋白疫苗对小鼠的抗病免疫效果。方法 pet32a/SjTsp2/Sj29 ku重组菌经异丙基硫代-β-D-半乳糖苷（IPTG）诱导表达,制备纯化的重组蛋白。29只6周龄雌性昆明鼠随机分为蛋白疫苗组、硫氧还蛋白组和空白对照组,前两组各10只,空白对照组9只。蛋白疫苗组,第一次免疫每鼠经背部皮下多点注射用等体积弗氏完全佐剂乳化的50μg SjTsp2/Sj29 ku重组表膜蛋白,第12、24天每鼠皮下多点再次注射用等体积弗氏不完全佐剂乳化的50μg该重组蛋白。硫氧还蛋白组的免疫方法同蛋白疫苗组。空白对照组用生理盐水代替蛋白,免疫方法同前。末次免疫后第10天,每鼠经腹部皮肤感染日本血吸虫尾蚴（30±2）条。于感染45 d后剖杀全部实验小鼠,计算减虫率和减卵率。眼眶取血,分离血清,间接性ELISA法检测IgG1、IgG2a、IgG2b、IgG3和IgM抗体亚型,同时检测血清细胞因子γ干扰素（IFN-γ）、白介素4（IL-4）水平。结果 pet32a/SjTsp2/Sj29 ku菌经IPTG诱导可大量表达,经变性、复性获得纯化的日本血吸虫Tsp2... 

【文章来源】：安徽医科大学学报. 2014,49(10)北大核心

【文章页数】：5 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 材料
        1.1.1 实验动物
        1.1.2 菌株
        1.1.3 主要试剂
    1.2 方法
        1.2.1 pet32a/Sj Tsp2/Sj29 ku重组菌鉴定
        1.2.2 Sj Tsp2/Sj29 ku重组蛋白的制备
        1.2.3 小鼠免疫保护性试验
        1.2.4 血清抗体亚型检测
        1.2.5 细胞因子IL-4、IFN-γ检测
    1.3 统计学处理
2 结果
    2.1 pet32a/Sj Tsp2/Sj29 ku重组基因测序鉴定
    2.2 pet32a/Sj Tsp2/Sj29 ku融合蛋白的表达及SDS-PAGE分析
    2.3 重组蛋白的免疫保护作用
    2.4 抗体亚型Ig G1、Ig G2a、Ig G2b、Ig G3和Ig M检测
    2.5 小鼠血清细胞因子检测
3 讨论


【参考文献】：
期刊论文
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本文编号：3201418