安徽省三种常见蜚蠊可溶性蛋白质和基因组多态性DNA的分析

发布时间：2021-08-19 07:58

　　目的 应用十二烷基硫酸钠—聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS—PAGE）和随机扩增多态性DNA（RAPD）技术获取安徽省三种常见蜚蠊的可溶性蛋白质区带和DNA指纹图谱，对三种常见蜚蠊的可溶性蛋白质和基因组DNA多态性进行分析研究，为蜚蠊分类提供科学依据。方法 采集安徽省三种常见蜚蠊黑胸大蠊、美洲大蠊、德国小蠊成虫标本，进行形态学的分析鉴定。首先应用冻融匀浆法制备这三种蜚蠊的可溶性蛋白质匀浆液，进行十二烷基硫酸钠—聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS—PAGE），获取三种常见蜚蠊的可溶性蛋白质区带，用考马斯亮蓝G-250染色后，观察和计算出各蜚蠊主要蛋白质区带的分子量。然后，提取三种蜚蠊的基因组DNA，进行鉴定及定量分析。确定随机扩增多态性DNA（RAPD）反应总体积、反应条件。选取5条不同的随机排列碱基顺序的多聚核苷酸单链为引物，进行RAPD-PCR扩增反应。将扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳，获得这三种蜚蠊的DNA图谱，计算出三种蜚蠊种间的遗传距离。最后对这三种蜚蠊可溶性蛋白质区带和基因组DNA多态性分析和研究。结果 用十二烷基硫酸钠—聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS—PAGE）进行研究显示：黑胸大蠊（P.f.）... 

【文章来源】：安徽医科大学安徽省

【文章页数】：53 页

【学位级别】：硕士

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安徽省三种常见蜚蠊可溶性蛋白质和基因组DNA的分析
    1 前言
    2 材料与方法
        2.1 材料
        2.2 方法
            2.2.1 SDS-PAGE方法
                2.2.1.1 取蜚蠊成虫的胸段制备蛋白质匀浆
                2.2.1.2 SDS-PAGE电泳
                2.2.1.3 数据处理
            2.2.2 RAPD方法
                2.2.2.1 取蜚蠊成虫的胸段提取基因组DNA
                2.2.2.2 DNA的纯度及定量分析
                2.2.2.3 基因组DNA扩增
                2.2.2.4 基因组DNA扩增产物的检测
                2.2.2.5 数据处理
    3 结 果
        3.1 三种蜚蠊可溶性蛋白质SDS-PAGE结果
        3.2 三种蜚蠊基因组DNA随机扩增（RAPD）结果
    4 讨 论
        4.1 关于SDS-PAGE实验结果的讨论
        4.2 关于RAPD实验结果的讨论
        4.3 关于实验条件的分析讨论
            4.3.1 蜚蠊的取材
                4.3.1.1 不同虫期标本的选择
                4.3.1.2 不同保存方法的影响
            4.3.2 SDS-PAGE和RAPD实验条件讨论
                4.3.2.1 关于RAPD实验条件讨论
                4.3.2.2 关于SDS-PAGE实验条件讨论
        4.4 关于SDS-PAGE和RAPD用于昆虫分类的研究
        4.5 本研究尚存在的不足和进一步展望
    5 小结
参考文献
附 录
致 谢
综 述



本文编号：3351031