胃癌原位种植淋巴转移动物模型的建立
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【摘要】:目的:胃癌淋巴结转移一直是困扰临床医生的难题,动物模型是研究胃癌淋巴转移的重要方法。目前尚缺乏一个经典的动物模型来模拟淋巴转移的过程,实验动物的选择也缺乏标准。本研究旨在筛选适合胃癌淋巴转移研究的实验动物和成瘤接种方法,为胃癌淋巴转移动物模型的建立打下基础。方法:一、比较裸鼠和新西兰大白兔胃癌成瘤建模的可行性1.分别在6只BALB/C-nu/nu裸鼠和新西兰大白兔胃壁中注射HGC27细胞系;2.在6只新西兰大白兔胃壁中注射VX2组织悬液;3.比较裸鼠和新西兰大白兔胃癌成瘤的结果和VX2细胞成瘤的结果二、比较细胞悬液和肿瘤组织块原位接种两种不同的方法建模的特点1.将65只BALB/C-nu/nu裸鼠,随机分成两组,A组30只、B组35只;A组在裸鼠胃壁注入人胃癌HGC27细胞悬液;B组先在5只裸鼠皮下注射HGC27细胞悬液,待裸鼠皮下瘤块达到1 cn* 1cm大小时,取出瘤块,放入RPMI-1640中,切成1mm3左右的小瘤块,将小瘤块原位接种到剩余的30只裸鼠胃壁;2.分别在接种肿瘤14天、21天、28天,取胃组织、胃周以及肠系膜中的淋巴结、肝、脾、肾、肠系膜病理检查;3.比较2组胃癌成瘤、腹腔转移、腹水形成及淋巴结转移的情况。结果:1.应用人胃癌HGC27细胞系在裸鼠中成功建立胃癌淋巴转移原位模型,在新西兰大白兔中造模不成功;2.VX2组织块在新西兰大白兔中可诱导淋巴转移模型,但由于VX2是兔源性的上皮鳞癌细胞,与胃癌细胞株生物学特性存在一定的差异;3.A组裸鼠用HGC27细胞悬液成瘤,胃部原位成瘤率100%,淋巴结转移率81.8%,脾脏转移率63.6%,肾脏转移率45.5%,腹腔种植率54,5%,腹水形成率54.5%;4.B组裸鼠用HGC27组织块成瘤,胃部原位成瘤率100%,淋巴结转移率100%,脾脏转移率83.3%,肾脏转移率66.7%,腹腔种植率100%,腹水形成率100%;5.A、B组裸鼠体重均随着接种时间呈下降趋势,其中A组中位生存时间38天,B组中位生存时间30天;结论:裸鼠较新西兰大白兔更适合应用于胃癌淋巴转移原位动物模型的建立。在裸鼠动物模型中,细胞悬液成瘤方法具有较长的中位生存时间和较低的腹水形成率,适合于胃癌淋巴结转移的机制研究。组织块成瘤方法具有较高的腹腔种植率和腹水形成率,适合于胃癌腹腔转移的机制研究。
【关键词】:胃癌 HGC27 实验动物 模型
【学位授予单位】:南京大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2016
【分类号】:R-332;R735.2
【目录】:
- 本课题基金来源5-6
- 摘要6-8
- Abstract8-12
- 前言12-13
- 实验内容与实验方法13-19
- 实验内容13
- 实验材料与仪器13-15
- 实验方法15-18
- 统计学分析18-19
- 结果19-28
- 一. 裸鼠和新西兰大白兔胃癌成瘤建模的可行性的比较19-20
- 二. 比较细胞悬液和肿瘤组织块原位接种两种不同的方法建模的特点20-28
- 1. 裸鼠皮下模型成瘤情况20
- 2. 人胃癌细胞株HGC27裸鼠胃壁原位模型的成瘤情况20-22
- 3. HGC27组织块裸鼠胃壁原位模型的成瘤情况22-23
- 4. 不同造模方法成瘤及腹腔脏器转移情况的比较23-24
- 5. 裸鼠体重及日常活动的变化24-25
- 6. 裸鼠组织病理分析25-27
- 7. 免疫组化27-28
- 结论28-31
- 总结31-32
- 参考文献32-38
- 综述38-44
- 参考文献41-44
- 硕士期间发表的文章44-45
- 致谢45-47
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