三种成体干细胞对脂多糖诱导RAW264.7细胞炎症状态的影响

发布时间：2017-07-26 22:23

  本文关键词：三种成体干细胞对脂多糖诱导RAW264.7细胞炎症状态的影响

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【摘要】：目的比较人羊膜上皮细胞((human amniotic epithelial cell,H-AEC))、羊膜间充质细胞(human amniotic mesenchymal cell,HA-MSC)和脐带间充质细胞(Umbilical cord mesenchymal stem cells,UC-MSC)分泌的细胞因子对脂多糖刺激巨噬细胞系RAW264.7炎症状态的影响。方法将LPS刺激的RAW264.7细胞炎症模型作为对照组,比较H-AEC、HA-MSC、UC-MSC和RAW264.7共培养或条件培养基培养RAW264.7对RAW264.7炎症状态的影响。比较各组RAW264.7细胞的迁移能力;检测各组细胞分泌一氧化氮(NO)的水平;用实时定量多聚酶链反应(RT-PCR)检测各组细胞经典激活的巨噬细胞(classically activated macrophage,M1 macrophage)相关的促炎基因如白介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死基因а(TNFа)、一氧化氮合成酶-2(NOS-2)以及M2 macrophage相关的抑炎基因如精氨酸酶(Arg-1)、甘露糖受体基因CD206、B类清道夫受体CD36)表达情况。结果 (1)H-AEC、HA-MSC、UC-MSC处理后RAW264.7的迁移率分别为14.7%±4.5%、9.6%±0.7%、13.0%±0.9%,与对照组(31.1%±11.0%)相比,3种细胞的条件培养基处理后RAW264.7的迁移率均降低,差异具有显著性(P0.05);(2)H-AEC、HA-MSC、UCMSC共培养后RAW264.7细胞分泌NO的水平分别为24.26±0.72、44.52±2.51、42.25±0.76μmol/L,与对照组(45.65±1.78μmol/L)相比,H-AEC组细胞分泌的NO有显著性下降(P0.05);(3)促炎基因与抑炎基因的表达改变:(A)H-AEC处理组促炎基因IL-1β、TNFа、NOS-2、INFβ的表达下调,与对照组相比有显著差别;HA-MSC、UC-MSC处理组促炎基因INFβ表达下调显著,其余基因均上调表达;抑炎相关基因如Arg-1、CD206、CD36均上调;(B)3组细胞干预后抑炎症相关基因Arg-1、CD206、CD36表达均上调,与对照组有显著差异。结论人羊膜上皮细胞、羊膜间充质细胞和脐带间充质细胞可以促进巨噬细胞向M2型分化,但其效果和机制存在不同。
【作者单位】： 中南大学生殖与干细胞工程研究所;中南大学人类干细胞国家工程研究中心;
【关键词】： 羊膜上皮细胞 羊膜间充质细胞 脐带间充质细胞 M型巨噬细胞 M型巨噬细胞
【基金】：国家自然科学基金(30700272) 教育部新教师基金(20070533080) 湖南省科学基金(2009FJ3180) 长沙科技计划(K1203005-31)~~
【分类号】：R329.2
【正文快照】： 巨噬细胞可分为M1型巨噬细胞即经典活化巨噬细胞和M2型巨噬细胞即旁路活化巨噬细胞,M1型巨噬细胞分泌炎症因子如肿瘤坏死因子(TNFа)、白介素1β(IL-1β)、诱导型氨合成酶(NOS-2)等,M2型巨噬细胞分泌抑炎因子如精氨酸酶(Arg-1)、甘露糖受体基因CD206等[1-2]。间充质细胞(MSC)

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本文编号：578650