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一种高成活率培养大鼠原代心肌细胞的方法

发布时间:2017-08-20 12:29

  本文关键词:一种高成活率培养大鼠原代心肌细胞的方法


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【摘要】:【目的】探讨原代心肌细胞培养的条件和方法。【方法】取新生1~3 d的SD大鼠心室肌,0.25%胰蛋白酶-0.02%EDTA消化后,培养于DMEM-F12培养液中,用差速贴壁法和化学抑制法相结合去除非心肌细胞。倒置显微镜下观察形态学变化,透射电镜观察细胞超微结构。【结果】培养的心肌细胞平均存活率(96.33±6.73)%,培养第4天细胞搏动率达(95.3±9.2)%,并出现单层同步搏动,具有典型的心肌细胞形态特征。【结论】本研究的心肌细胞培养方法操作简便,成活率高,是一种较为理想的原代心肌细胞培养方法。
【作者单位】: 武警后勤学院救援医学系药物化学与药物分析教研室;武警后勤学院科研部成果处;天津市职业与环境危害生物标志物重点实验室;
【关键词】心肌细胞 原代培养 大鼠
【基金】:国家自然科学基金项目(81073152) 天津市自然科学基金重点项目(12JCZDJC34700) 武警后勤学院创新团队课题(WHTD201303-1)
【分类号】:R329.2
【正文快照】: 原代培养的乳鼠心肌细胞是细胞电生理、药理学、毒理学等方面广泛应用的研究工具。自1960年Harary等[1]首次对Wister乳鼠的心肌细胞进行培养并成功维持其自发性搏动长达40 d以来,国内外许多学者对心肌细胞原代培养方法不断地进行研究,但仍存在细胞存活率低、纯度不高等缺陷。

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前1条

1 庞勇军;孙莉;谢文娟;莫书荣;;新生大鼠心肌细胞分离、纯化及培养方法的改进[J];上海交通大学学报(医学版);2011年04期

【共引文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 刘爱林,余日安,鲁文清;3-氯-4-二氯甲基-5-羟基-2(5氢)-呋喃酮对L-02细胞增殖周期和凋亡的影响[J];癌变.畸变.突变;2005年06期

2 李运东;张桂贤;安晶;刘青;陈维伟;;革胡子鲶全血培养制备染色体条件探索[J];安徽农业科学;2012年04期

3 沈超,郑从义,李朝阳,屈三甫;离体培养细胞系冷休克敏感差异性的研究[J];氨基酸和生物资源;2003年04期

4 安晶;张桂贤;李运东;刘青;陈维伟;;鲤鱼冻血细胞培养及染色体制备条件优化研究[J];现代农业科技;2012年02期

5 王健伟;任丽丽;屈建国;孙异临;陈良标;洪涛;;SARS-CoV在Vero细胞培养中的多形性特征[J];病毒学报;2006年01期

6 郭宇飞;程安春;汪铭书;贾仁勇;文明;周伟光;周毅;陈孝跃;;鸭胚成纤维细胞中鸭瘟强毒的增殖特性研究[J];病毒学报;2008年05期

7 吕道远,宋平,陈云贵,彭茂宇,桂建芳;黄鳝性腺自然逆转过程中vasa基因的表达分析[J];动物学报;2005年03期

8 李桢,邹红岩,吴国光,程良红,王大明,唐斯;HLA新基因B"非汉字符号"610携带者家系B淋巴细胞系的建立[J];中国输血杂志;2004年05期

9 潘丽艳;郭喜平;李淑红;崔黎明;刘冰;刘利;赫荣华;田玉玲;;胡桃楸树皮提取物对SMMC-7721、MCF-7和A549肿瘤细胞的抑制作用及其机制[J];吉林大学学报(医学版);2009年01期

10 何娉婷;陶杰;薛建军;陈玉兰;;梭形纳米二氧化钛溶胶的制备及其抗菌性能和细胞毒性[J];材料导报;2011年08期

中国重要会议论文全文数据库 前2条

1 唐小江;马争;黄建勋;黄汉林;李来玉;牛侨;;正己烷引起红细胞膜血影蛋白交联的研究[A];中国环境诱变剂学会抗诱变剂和抗癌剂专业委员会第三次全国学术会议、中国毒理学会生化与分子毒理专业委员会第五届学术交流会、贵州省环境诱变剂学会成立大会暨首届学术交流会论文集[C];2004年

2 李青;许小琴;王志刚;王彬;;板蓝根多糖对小鹅瘟病毒体外抑制作用的研究[A];纪念中国畜牧兽医学会中兽医学分会成立30周年中国畜牧兽医学会中兽医学分会2009年学术年会、华东区第十九次中兽医科研协作与学术研讨会论文集[C];2009年

中国博士学位论文全文数据库 前10条

1 郑小坚;家蚕类胰岛素基因BBX-B8的功能研究[D];苏州大学;2010年

2 王翠翠;文蛤多肽的分离纯化及抗肿瘤机制研究[D];中国科学院研究生院(海洋研究所);2011年

3 李树春;自体HCN2-MSCs希氏束内移植治疗完全性房室传导阻滞的实验研究[D];第二军医大学;2011年

4 朱高浦;山茶花MADS-box家族B类基因克隆及在重瓣花形成中的作用[D];中国林业科学研究院;2011年

5 王彤光;60例犬乳腺肿瘤病理组织学、手术及预后的调查与研究[D];南京农业大学;2011年

6 肖剑;重组腺病毒介导的人转化生长因子β_1基因调节椎间盘生物功能的实验研究[D];第二军医大学;2002年

7 郝文波;噬菌体肽库技术筛选特异阻断恶性疟原虫感染红细胞粘附短肽的研究[D];第一军医大学;2002年

8 傅赞;p15、p16在胆系癌中表达及对人胆管癌细胞增殖影响的实验对比研究[D];南京医科大学;2003年

9 于红;钝顶螺旋藻多糖抗病毒及抗肿瘤作用的研究[D];中国海洋大学;2003年

10 王兆卿;中心体定位的具有原癌基因属性的人源新基因cepo的功能研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2003年

中国硕士学位论文全文数据库 前10条

1 蔡玉;雷公藤甲素对子宫内膜癌细胞株作用的实验研究[D];南京医科大学;2009年

2 张晓伟;N,N'-双(N-羟乙基氨丙基)草酰胺桥联多核配合物的合成、晶体结构及与DNA相互作用研究[D];中国海洋大学;2010年

3 张丽;两种不同来源的视网膜Müller细胞体外培养的生长特性的研究[D];吉林大学;2011年

4 李文星;蓝靛果花色苷提取及其抗肿瘤功能机理的初步研究[D];东北林业大学;2011年

5 蔡拓;槟榔碱体外代谢的实验研究[D];中南大学;2011年

6 向骏;鸭瘟病毒VP19c蛋白的表达、细胞内定位及RNA干扰抑制病毒复制的初步研究[D];四川农业大学;2011年

7 温丽媛;有机锑羧酸衍生物的合成、表征及结构研究[D];聊城大学;2010年

8 王燕;致病性坏死梭杆菌细胞壁溶胶原成分分离纯化及细胞毒性研究[D];江苏科技大学;2011年

9 刘玲娟;DNA甲基转移酶1在同型半胱氨酸致人脐静脉平滑肌细胞增殖中的作用研究[D];宁夏医科大学;2011年

10 米宁;甜菜碱对血管内皮细胞损伤的保护作用及机制研究[D];泰山医学院;2011年

【二级参考文献】

中国期刊全文数据库 前5条

1 张颖;郑燕倩;王红卫;杨智f ;刘远谋;李慈珍;;新生大鼠心肌细胞培养及电生理特性观察[J];上海交通大学学报(医学版);2007年04期

2 刘霞,王常勇;新生大鼠心肌细胞的分离和培养[J];西北农林科技大学学报(自然科学版);2005年06期

3 郝亚荣,李建军,李庚山,王晶;乳鼠心肌细胞的原代培养[J];心脏杂志;2001年06期

4 罗明富;李翠红;张金铃;郭莹;陈淑萍;刘俊岭;李瑞午;;针刺血清降低大鼠培养心肌细胞内Ca~(2+)含量的研究[J];中国针灸;2006年05期

5 王佳南;张晓刚;汤为学;郑丽娜;;新生大鼠心肌细胞原代培养方法的改良[J];重庆医科大学学报;2009年05期

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 刘霞;史明艳;欧阳五庆;;乳鼠心肌细胞的体外三维培养[J];西北农林科技大学学报(自然科学版);2009年03期

2 于宁;李应东;刘凯;陈彻;;新生大鼠心肌细胞的原代培养方法的探讨[J];兰州大学学报(医学版);2006年02期

3 李德;唐兵;杨大春;马双陶;杨永健;;Ⅱ型胶原酶加压灌流提高成年大鼠心肌细胞分离效率[J];中国实验动物学报;2011年02期

4 裴兆辉,陈景藻,朱妙章,裴建明,庄志强,刘静;8 Hz、90 dB次声引起的心肌细胞超微结构变化及相关机制的探讨[J];心脏杂志;2005年03期

5 陈小迅,张书永,田珑,陈莉,夏家骝;大鼠心肌间质胶原的扫描电镜观察[J];解剖学报;2002年02期

6 姜胜利,李功宋,顾峥;培养鼠心肌细胞在移植大鼠体内生长发育的初步观察[J];军医进修学院学报;2001年02期

7 周京军,朱运龙,裴建明,高瞻,王跃民;阿片受体κ亚型在大鼠心肌细胞热应激反应中的作用[J];心脏杂志;2001年05期

8 陈吉球;心肌细胞分离术[J];中国病理生理杂志;1999年05期

9 包伟珂,柏树令,王军;升主动脉缩窄心衰游离心肌细胞骨架三椎构筑特点[J];解剖学杂志;1999年01期

10 殷国田,郭志坤;大鼠心肌细胞琥珀酸脱氢酶和三磷酸腺苷酶的增龄变化[J];新乡医学院学报;2002年06期

中国重要会议论文全文数据库 前10条

1 王会平;夏强;王琳琳;曹春梅;叶治国;;白细胞介素-2预处理对缺氧/复氧下心肌细胞功能的影响[A];中国生理学会第六届应用生理学委员会全国学术会议论文摘要汇编[C];2003年

2 张玉霞;刘铭球;喻伦银;刁路明;唐志佼;夏东;王敏;;血管紧张素Ⅱ诱导心肌细胞、成纤维细胞增殖和肥大中cyclinD_2和p16基因转录及蛋白表达变化[A];新世纪 新机遇 新挑战——知识创新和高新技术产业发展(上册)[C];2001年

3 张广钦;付昱;白淑华;周曾铨;王世强;;冬眠动物黄鼠心肌细胞自发钙火花的低温适应性[A];中国生理学会第五届比较生理学学术会议论文汇编[C];2004年

4 徐容;Kenneth W.Spitzer;;应用荧光探针测定单个心肌细胞内的氯离子浓度[A];动物学专辑——上海市动物学会2000年年会论文集[C];2000年

5 李晓晨;王世强;;冬眠动物心肌细胞耐受低温机制研究[A];“基因、进化与生理功能多样性”海内外学术研讨会暨中国生理学会第七届比较生理学学术会议论文摘要[C];2009年

6 王敏;邢燕;张旭;陈政;董先智;姬广聚;;ANP对胚胎干细胞分化心肌细胞Ⅰ_(cal)的调节作用[A];第十次中国生物物理学术大会论文摘要集[C];2006年

7 陈胜锋;江青艳;朱晓彤;;大鼠脂肪前体细胞的原代培养[A];动物生理生化学分会第八次学术会议暨全国反刍动物营养生理生化第三次学术研讨会论文摘要汇编[C];2004年

8 熊江辉;李莹辉;杨唐斌;聂捷琳;张德良;赵保路;;一氧化氮对模拟失重下心肌细胞功能的影响[A];第五届全国自由基生物学与自由基医学学术讨论会论文摘要汇编[C];2000年

9 阳冬梅;吴才宏;程和平;;钙调蛋白对心肌细胞兴奋—收缩耦联的调节作用[A];第九次全国生物物理大会学术会议论文摘要集[C];2002年

10 赵文然;张中海;钟照华;;B组柯萨奇病毒在原代培养心肌细胞中的持续感染[A];中国细胞生物学学会第九次会员代表大会暨青年学术大会论文摘要集[C];2007年

中国重要报纸全文数据库 前10条

1 孙忻;人类首次获得克隆大鼠[N];科技日报;2003年

2 记者 许琦敏;大鼠有望成实验室头号“明星”[N];文汇报;2010年

3 记者 姜澎;聪明大鼠 解密大脑记忆功能[N];文汇报;2009年

4 张天行;克隆大鼠意义重大[N];中国医药报;2003年

5 冯卫东;首个基因靶标剔除大鼠培育成功[N];科技日报;2009年

6 毛文波;有了小的也需要大的[N];科技日报;2003年

7 奇 云;解读大鼠基因有助人类攻克疑难病症[N];大众科技报;2004年

8 记者 王洁明;成功克隆大鼠 我学者获国际奖[N];新华每日电讯;2004年

9 记者 蓝建中;日本研究:骨髓移植使大鼠血管“返老还童”[N];新华每日电讯;2010年

10 闻讯;日本成功从牙胚中分离出间充质干细胞[N];医药经济报;2006年

中国博士学位论文全文数据库 前10条

1 孙彦洵;Smad5基因在小鼠胚胎干细胞增殖、分化及凋亡中的功能与机制[D];中国人民解放军军事医学科学院;2005年

2 赵利峰;肝脏细胞生长相关基因在大鼠肝再生中表达模式和作用分析[D];中国海洋大学;2008年

3 李明波;大鼠掠食行为的神经生物学探讨[D];中南大学;2012年

4 陈璐;脑源性神经营养因子及神经营养因子4对大鼠促性腺激素分泌及其受体表达的影响[D];吉林大学;2012年

5 云洋;二氧化硫诱导大鼠海马神经元损伤效应及其分子机制研究[D];山西大学;2011年

6 王亚坤;D-核糖对大鼠生理机能的影响及其机制[D];河北师范大学;2009年

7 霍洪亮;17β-雌二醇对心肌细胞缺氧/复氧损伤保护机制的研究[D];东北师范大学;2010年

8 李玲;尾加压素Ⅱ的心血管作用及机制研究[D];第二军医大学;2002年

9 石新琳;双模态标记F344大鼠骨髓间充质干细胞体外及体内实验研究初探[D];北京协和医学院;2012年

10 方滟佳;花生四烯酸对大鼠小脑颗粒细胞上电压门控钠通道及rNav1.2调控机制的研究[D];复旦大学;2011年

中国硕士学位论文全文数据库 前10条

1 王娜;低铁、高铁对原代培养的大鼠心肌细胞铁转运相关蛋白表达的影响[D];河北师范大学;2005年

2 杨科峰;基于BCI的大鼠运动行为控制的研究[D];郑州大学;2011年

3 高彩暇;急性长时间运动对大鼠心肌线粒体NO、NOS水平以及线粒体RCR、抑制ROS能力和[Ca~(2+)]i的影响[D];华东师范大学;2005年

4 赖小刚;阴离子通道对大鼠心室肌细胞瞬时外向钾通道的调控研究[D];第四军医大学;2005年

5 郭军;细胞因子预处理对骨髓间充质干细胞增殖分化的影响[D];武汉大学;2005年

6 元媛;低氧调节大鼠CRFR1受体细胞内信号通路[D];浙江大学;2012年

7 孙志宏;大鼠脑内γ-干扰素样免疫反应产物分布及电针后变化[D];西北农林科技大学;2001年

8 陈超;高功率毫米波对血液生化指标影响研究[D];华东师范大学;2009年

9 林玲;不同色光刺激对大鼠初级视皮层电活动的影响[D];郑州大学;2010年

10 陆琼;ERK1/2和JNK信号通路对大鼠再生肝8种细胞的增殖和凋亡调控作用研究[D];河南师范大学;2011年



本文编号:706661

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