壳聚糖-海藻酸钠包被的副溶血弧菌外膜蛋白K微球疫苗的制备及其口服免疫效果
本文关键词：壳聚糖-海藻酸钠包被的副溶血弧菌外膜蛋白K微球疫苗的制备及其口服免疫效果
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【摘要】：目的制备壳聚糖-海藻酸钠包被的副溶血弧菌外膜蛋白(outer membrane protein,omp)K微球疫苗,并检测其对大黄鱼的口服免疫效果。方法采用乳化-离子交联法制备副溶血弧菌ompK微球疫苗,筛选表面活性剂司盘-80添加量及壳聚糖包被浓度,经正交试验优化微球疫苗的制备工艺,筛选微球疫苗的冻干保护剂。检测采用优化条件制备的微球疫苗的理化特性及其在不同条件下的释放特性,并将微球添加到饵料中,连续5 d投喂大黄鱼,第28天以副溶血弧菌zj2003攻击,检测口服微球疫苗的免疫保护率。结果最适司盘-80添加量为2%~4%,壳聚糖包被浓度为0.6%~0.7%;优化的微球疫苗制备条件为:抗原蛋白浓度10 mg/ml,海藻酸钠浓度1.0%,水油比1∶2,搅拌速度2 000 r/min;微球疫苗的最佳冻干保护剂为2%甘露醇;以优化的条件制备的微球圆整性、分散性好,平均直径为(1.91±1.02)μm,表现出酸性条件稳定、中性和弱碱性条件溶胀的特性;微球疫苗口服免疫的大黄鱼对副溶血弧菌zj2003攻击表现出中等程度的保护力。结论制备了壳聚糖-海藻酸钠包被的副溶血弧菌ompK微球疫苗,并验证了其口服免疫的有效性,为鱼类口服弧菌疫苗的研制及应用奠定了基础。
【作者单位】： 浙江中医药大学生命科学学院;浙江万里学院生物与环境学院;
【关键词】： 海藻酸钠 壳聚糖 外膜蛋白K 微球 口服免疫
【基金】：国家星火项目(2011GA701001) 浙江省“现代微生物技术与应用”重中之重学科开放基金项目(1740001920)
【分类号】：R392-33
【正文快照】： 传统的弧菌疫苗一般经注射和浸泡两种途径免疫鱼类,注射免疫虽然效果较好,但操作难度高,劳动强度大,对鱼类的副作用较明显;浸泡免疫则存在免疫保护效果不稳定、保护期不长等缺点。而口服免疫接种方便,同时可激发体液免疫和黏膜免疫,鱼类本身无应激反应,因此开发高效的口服疫苗
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