环介导等温扩增法检测棘颚口线虫方法的建立

发布时间：2017-10-14 10:16

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【摘要】：棘颚口线虫是引起人体颚口线虫病最主要的病原,其引起的病例呈世界性分布。由于其复杂的生活史,以及不同生长阶段形态的变化差异,传统的形态学鉴定方法很难鉴别。为了快速、灵敏和可靠的鉴定棘颚口线虫,本研究建立了一套检测棘颚口线虫的DNA环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)方法。根据LAMP方法原理,针对棘颚口线虫的ITS2 rDNA设计了三套特异性引物特异性识别靶基因。进行了特异性、灵敏度、稳定性和实际样品的测试。结果表明,该方法对棘颚口线虫DNA能够特异性扩增,而比对虫体DNA均无扩增;对含有棘颚口线虫ITS2目的基因片段的质粒DNA的检测限为1 fg/μL,比传统的PCR方法灵敏度高100倍;对51批次实际样品的进行检测,LAMP方法与传统的PCR测序方法结果相符。本研究设计的LAMP检测方法适用于特异性检测棘颚口线虫。
【作者单位】： 华南理工大学食品科学与工程学院;广州机场出入境检验检疫局国家水产品检测重点实验室;暨南大学食品安全与营养研究院;
【关键词】： 环介导等温扩增技术(LAMP) 棘颚口线虫 快速检测
【基金】：国家质量监督检验检疫总局科技计划项目(2015IK055) 广东出入境检验检疫局科技项目(2014GDK25)
【分类号】：R532.1
【正文快照】： 颚口线虫病是人感染颚口线虫属线虫的幼虫而 引起的疾病,主要是由于食入生的或未熟的含有颚口线虫的淡水鱼。它能够引起人的移行性皮下包块,还可侵袭深部组织和器官,如肺、眼、肝、肾和神经系统等,引起严重症状甚至死亡[1~3]。颚口线虫有13个种,目前已报道的致病种有6个,其中

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