微滴数字PCR定量检测全血样品中结核分枝杆菌特异CFP10基因

发布时间：2017-10-29 19:10

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【摘要】：目的采用微滴数字PCR技术(droplet digital PCR,dd PCR)检测全血中结核分枝杆菌特异性CFP10(10-k Da culture filtrate protein,CFP10)基因的拷贝数含量。方法收集10例活动性肺结核患者(active tuberculosis,a TB)、10例肺外结核患者(extrapulmonary tuberculosis,EPTB)和5例健康对照者(healthy donars,HDs)全血并提取DNA,优化引物最佳扩增条件并制定重组质粒标准曲线,对样本中CFP10基因的拷贝数含量分别用dd PCR与实时定量PCR(quantitative real-time PCR,q PCR)进行检测和比较。结果对重组质粒的灵敏度检测显示dd PCR技术明显优于q PCR技术。对样本的检测显示q PCR技术检测a TB、EPTB患者与健康人的全血中CFP10含量之间无统计学意义;但是dd PCR技术检测a TB、EPTB患者与健康人之间有显著统计学意义(P0.0001);dd PCR检测a TB和EPTB患者(共20例)CFP10基因绝对定量的浓度约为3.4~94.0 copies/μL。结论本研究首次报道采用dd PCR技术能灵敏地用于TB患者全血的诊断。
【作者单位】： 武汉大学病毒学国家重点实验室/湖北省过敏及免疫相关疾病重点实验室/武汉大学医学研究院/武汉大学基础医学院免疫学系;武汉市医疗救治中心;
【关键词】： 微滴数字PCR 结核分枝杆菌 定量检测 CFP
【基金】：国家重大传染病专项(2012ZX10003002) 国家自然科学基金项目(31270176,81471910) 国家杰出青年科学基金(81025008)
【分类号】：R52;R440
【正文快照】： (1.武汉大学病毒学国家重点实验室/湖北省过敏及免疫相关疾病重点实验室/武汉大学医学研究院/武汉大学基础医学院免疫学系,湖北武汉430071;2.武汉市医疗救治中心,湖北武汉430071)结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB),俗称结核杆菌,是引起人结核病的主要病原菌。结核

【参考文献】

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