发热伴血小板减少综合征布尼亚病毒非结构蛋白NSs原核表达载体的构建与表达

发布时间：2018-03-20 22:23

  本文选题：发热伴血小板减少综合征布尼亚病毒　切入点：NSs　出处：《现代预防医学》2015年10期 　论文类型：期刊论文

【摘要】：目的利用大肠杆菌原核表达系统表达发热伴血小板减少综合征布尼亚病毒(SFTSV)NSs重组蛋白。方法采用RT-PCR技术,从SFTSV毒株提取的病毒总RNA中,扩增NSs全长基因,将其克隆至p ET22b(+)中构建原核表达载体p ET22b-NSs,经酶切及测序鉴定后转化表达菌BL21(DE3),IPTG诱导,通过Western Blot鉴定NSs蛋白的表达。结果酶切、测序证明重组原核表达载体p ET22b-NSs构建成功,免疫印迹法可见NSs基因编码蛋白表达。结论实现了发热伴血小板减少综合征布尼亚病毒重组NSs蛋白的原核高效表达,为进一步深入研究发热伴血小板减少综合征布尼亚病毒NSs蛋白的结构与功能奠定了基础。
[Abstract]:Objective to express the recombinant protein of SFT SVS NSs of Bunia virus with fever and thrombocytopenia syndrome by E. coli prokaryotic expression system. Methods the full-length NSs gene was amplified from the total RNA of the virus extracted from the SFTSV strain by RT-PCR technique. The prokaryotic expression vector pET22b-NSswas cloned into pET22b (). The expression of NSs protein was induced by restriction endonuclease digestion and sequencing, and the expression of NSs protein was identified by Western Blot. Results the recombinant prokaryotic expression vector p ET22b-NSs was successfully constructed by restriction endonuclease digestion and sequencing. Conclusion the prokaryotic expression of recombinant NSs protein of fever associated with thrombocytopenia syndrome virus can be achieved by Western blotting. The results laid a foundation for further study on the structure and function of NSs protein of Bunia virus with fever and thrombocytopenia syndrome.
【作者单位】： 江苏省疾病预防控制中心;
【分类号】：R510

【参考文献】

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【共引文献】

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本文编号：1641047