广东省猪群和执业人群流感病毒血清学调查及新型PICV载体流感疫苗免疫保护效果评价
本文选题：动物源性流感病毒 切入点：猪 出处：《华南农业大学》2016年博士论文
【摘要】：A型流感病毒宿主范围广泛,如:人、猪、禽、犬等。由于猪呼吸道上皮细胞的受体分布特性,猪可以被禽类和人类流感病毒感染,而猪流感病毒也可感染人。因此,猪被认为是人、猪、禽流感病毒的天然“混合器”,猪流感病毒的常规监测具有重要的公共卫生安全学意义。目前抵抗流感病毒侵袭的最好方法是进行疫苗免疫。但由于流感病毒基因组特征,病毒基因极不稳定,进化频繁。疫苗形式及免疫策略有限,这使有效预防流感病毒的传染和传播变得困难。为评估广东地区猪群、执业人群感染多种亚型流感病毒的风险,从2013年3月至2014年3月,分别从广东省6个不同城市的生猪养殖场和活禽市场中分别采集猪群血清样本,共6510份。其中,生猪养殖场样本4910份,活禽市场样本1600份。通过血凝抑制(HI)检测血清中抗人类、猪和禽流感病毒抗体的水平,同时分析各采样城市地理位置、生长阶段(或活禽市场中存留时间)、季节等因素对血清阳性率影响。通过单因素分析法,计算各因素对猪群感染不同流感病毒风险的影响。结果显示,影响猪群不同亚型流感病毒感染的主要因素为生长阶段(或活禽市场内存留时间)和季节因素。在活禽市场中存留时间较长的猪只,感染禽流感的风险显著高于养殖场的猪。广东各地猪群在秋季感染流感病毒风险较其他季节高。此外与禽类有密切接触是猪群感染禽流感(及类禽猪流感)的主要风险因素。由2013年12月起至2014年1月,在广东省各地选取符合条件的猪场工人,禽场工人,活禽市场工作人员以及宠物医院兽医进行血清样本采集,同时采集无长期动物接触史的志愿者血清作为对照。利用HI试验检测志愿者血清中抗人类、猪、禽和犬流感病毒抗体的水平。运用单因素分析方法计算不同因素(如,年龄、性别、工作种类以及动物接触情况等)对人类血清抗体阳性率的影响。通过分析发现猪场工人感染经典猪流感和欧亚类禽猪流感的风险显著高于对照组。而禽场工人感染禽流感病毒AV/H7和AV/H9的风险则显著高于非禽类接触人群。活禽市场工作人员感染AV/H5、AV/H7和AV/H9的风险高于其他执业人群。活禽市场工作人员感染猪流感病毒的风险也高于对照组人群。该结果提示活禽市场工作人员同时面临两种不同宿主的流感病毒感染风险。Pichinde病毒(PICV)属于沙粒病毒科,沙粒病毒属成员,是双义编码RNA病毒。在感染初期主要攻击巨噬细胞和树突状细胞,并引起高水平的T细胞免疫反应。本研究将流感病毒PR8毒株的HA和NP基因同时嵌合到PICV载体上,构建成重组表达载体rP18tri-HA/NP。重组PICV嵌合表达流感的HA和NP蛋白。通过免疫小鼠,发现载体疫苗能有效诱导小鼠机体产生HA蛋白特异性中和抗体和NP蛋白特异性杀伤性T细胞免疫反应(CTLs)。利用MHC四聚体染色法(MHC Tetramer stain)检测特异性CTLs数量,结果显示首免后,小鼠CTL反应水平显著提高,并在二免后,该类型细胞数量仍能维持较高水平。不同分支或亚型流感毒株进行攻毒保护试验,结果显示免疫小鼠均能获得较好的交叉保护作用。评价机体抗载体免疫反应对疫苗免疫效果的影响,结果显示抗载体免疫反应会抑制疫苗诱导机体产生CTL免疫反应。评价嵌合不同亚型流感HA基因的疫苗交替免疫效果,经交替免疫嵌合H1和H3亚型流感病毒HA蛋白的载体疫苗后,小鼠能抵抗非免疫原流感病毒的侵袭。综上所述,该新型PICV载体疫苗能够有效地诱导机体产生体液和细胞免疫反应。为广谱流感疫苗的研制奠定基础。
[Abstract]:A wide variety of influenza A viruses such as humans , pigs , birds , dogs , etc . As a result of the receptor distribution characteristics of porcine respiratory epithelial cells , pigs can be infected by avian and human influenza viruses , and swine influenza viruses can also infect humans . In order to assess the risk of influenza virus infection among pigs in Guangdong Province from March 2013 to March 2014 , it was found that the risk of influenza virus infection in pigs was significantly higher than that in control group .
【学位授予单位】：华南农业大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：S858.28;R511.7
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，本文编号：1706149
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