血清CCL20水平在慢性HBV感染不同临床表型中的诊断价值

发布时间：2018-04-10 23:33

  本文选题：蛋白芯片 + 慢性乙型肝炎　； 参考：《第三军医大学》2014年硕士论文

【摘要】：目的：研究慢性HBV感染者不同临床表型细胞因子谱的特征及血清CCL20水平在HBV相关肝纤维化、肝硬化及肝细胞癌中的诊断价值。 方法：90例慢性HBV感染者，根据HBsAg浓度、HBV DNA、HBV血清标志物及ALT水平将其分为持续ALT正常和慢性乙型肝炎两部分。持续ALT正常者包括免疫耐受、非活性HBsAg携带、HBsAg清除等三种表型，健康献血员做对照；慢性乙型肝炎根据HBeAg状态分为HBeAg阳性和HBeAg阴性两种表型。通过定制的蛋白质芯片检测血清IFN-γ、IL-1β、IL-2、IL-4、IL-6、IL-7、IL-9、IL-10、IL-12p40、IL-12p70、 IL-15、 IL-17A、 IL-17C、 IL-21、 IL-22、 IL-23p19、 IL-28A、 IL-29、CCL5、CCL16、CCL20、CCL22、CXCL9、CXCL10、CXCL11、CD30、 GITR、IL-6R、 gp130和TGF-β1等30个细胞因子的表达水平，蛋白质相互作用分析工具STRING分析细胞因子间的相互作用。在此基础上，筛选出CCL20进行深入分析。共纳入85例慢性HBV感染者及45例HBV相关肝细胞癌患者，ELISA检测血清CCL20水平，PASW18.0统计学分析血清CCL20水平与其余反映肝脏病变程度的检测指标（血清肝纤维化指标、Fibroscan测定的肝脏硬度值、肝活检病理纤维化分期及肿瘤大小）的相关性，并对其在慢性HBV感染病情程度诊断的价值进行评估。 结果： 1.与健康对照相比，持续ALT正常的慢性HBV感染者JAK-STAT信号通路相关因子表达普遍上调，包括γ链细胞因子（IL-2、IL-4、IL-7、IL-9、IL-15及IL-21）、IL-12家族成员（IL-12p40、IL-12p70及IL-23p19）和λ干扰素（IL-28A和IL-29）；非活动性HBsAg携带组IL-2、IL-4、IL-15、IL-21、IL-12p70、IL-23p19及IL-29表达升高是其区别于其他两种表型的重要特征。 2.无论HBeAg阳性或阴性慢性乙型肝炎患者，，CXCL9、CXCL10、CXCL11、CCL20、IL-10、IL-4、IL-17C、IL-1β、IL-12p70、IL-17A与ALT均存在显著正相关性，CXC亚族的三个因子CXCL9、CXCL10、CXCL11的相关程度最高。gp130、IFN-γ、IL-23p19、IL-12p40、IL-22、IL-29、IL-6、IL-9、GITR与ALT的显著正相关仅见于HBeAg阳性慢性乙型肝炎中； IL-7、IL-21及TGF-β1与ALT的显著相关性仅见于HBeAg阴性慢性乙型肝炎。ALT＞5×ULN者与非活动性HBsAg携带组间的细胞因子表达差异数量分别为11个和17个，其中的11个因子在两种表型CHB组中一致，另外6个仅在HBeAg阴性慢性乙型肝炎组中呈现低表达的因子分别为IL-29、IL-6、IL-9、IL-6R、IFN-γ、TGF-β1。 3.血清CCL20水平在HBeAg阳性慢性乙型肝炎患者中与肝纤维化指标（HA、PCⅢ、 CⅣ、 LN）的相关性分析结果分别为0.444（P=0.008）、0.396（P=0.019）、0.424（P=0.011）和0.415（P=0.013），而在HBeAg阴性慢性乙型肝炎患者中相关性分析结果分别为0.731（P=9.930×10-6）、0.634（P=2.932×10-4）、0.361（P=0.218）和0.284（P=0.134）；其与肝脏硬度值的相关系数为0.507（P=7.282×10-7）。 4.血清CCL20诊断诊断肝纤维化的ROC曲线下面积为0.848，P=7.055×10-5，最佳临界值77.4pg/mL,敏感度70%，特异度96%；诊断不良预后肝癌的ROC曲线下面积0.718，P=0.03，最佳临界值66.9pg/mL。 结论： 1.JAK-STAT通路多种细胞因子表达上调是慢性HBV感染的重要免疫特征；IL-2、IL-15、IL-21、IL-12p70、IL-23p19及IL-29表达升高有利于HBV免疫清除； 2.CXCL9、CXCL10、CXCL11及CCL20适合作为衡量慢性HBV感染炎症程度的免疫评估指标；IL-29、IL-6、IL-9、IL-6R、IFN-γ、TGF-β1上调缺陷可能与HBeAg阴性慢性乙型肝炎的免疫发病机制有关； 3.CCL20在慢性乙型肝炎中具有促炎和致纤维化双重特征，其血清水平适合作为HBV相关肝纤维化、肝硬化和肝细胞癌的诊断和预后评估的免疫指标。
[Abstract]:Objective: To study the characteristics of cytokine profiles in different clinical phenotypes of chronic HBV infection and the diagnostic value of serum CCL20 level in HBV related liver fibrosis, cirrhosis and hepatocellular carcinoma.
Methods: 90 patients with chronic HBV infection, according to the concentration of HBsAg, HBV DNA, HBV serum markers and ALT levels will be divided into two parts for ALT in normal and chronic hepatitis B. Persistent normal ALT including immune tolerance, non active HBsAg carry, HBsAg clearance and other three kinds of phenotype, health volunteer blood donors as control; according to the HBeAg state of chronic hepatitis B were divided into HBeAg positive and two HBeAg negative phenotype. Through custom protein chip detection of serum IFN- gamma, IL-1 beta, IL-2, IL-4, IL-6, IL-7, IL-9, IL-10, IL-12p40, IL-12p70, IL-15, IL-17A, IL-17C, IL-21, IL-22, IL-23p19, IL-28A, IL-29, CCL5. CCL16, CCL20, CCL22, CXCL9, CXCL10, CXCL11, CD30, GITR, IL-6R, gp130 and TGF- beta 1 expression levels of 30 cytokines, protein interaction analysis of interaction between cytokines of the tool STRING. On this basis, CCL20 was selected for further analysis. A total of Na In 85 cases of patients with chronic HBV infection and 45 cases of HBV related hepatocellular carcinoma, serum CCL20 level of ELISA, PASW18.0 statistical analysis of serum CCL20 level and other indexes reflect the degree of liver disease (serum fibrosis index, Fibroscan determination of liver stiffness values, liver biopsy and pathological fibrosis staging and tumor size) correlation. And the severity of chronic HBV infection diagnosis value was evaluated.
Result锛

本文编号：1733453