慢性乙型肝炎患者肠道乙肝病毒DNA、菌群间比值、血清白细胞介素-17A～F的变化及肠道微生态制剂治疗的疗效研究

发布时间：2018-05-09 04:42

本文选题：慢性乙型肝炎 + HBV　；参考：《安徽医科大学》2016年博士论文

【摘要】：目的了解慢性乙型肝炎患者肠道HBV DNA、菌群间比值及血清白介素-17A~F变化情况以及应用肠道微生态制剂治疗对肠道HBV DNA、菌群间比值、血清白介素-17A~F变化以及肝功能变化的影响,探讨肠道微生态制剂治疗对慢性乙型肝炎疗效及可能的毒副作用。材料与方法选择66例慢性乙型肝炎患者,根据随机分组原则,对患者进行分组:常规治疗组(拉米夫定100mg qd,阿德福韦酯10mg qd;还原型谷胱苷肽1.8 qd,异甘草酸镁150mg qd,苦参素葡萄糖100ml qd。疗程14天后抗病毒治疗方案不变,根据肝功能情况予以调整护肝治疗方案)33例,微生态治疗组(在常规治疗组基础上同时加用酪酸梭菌二联活菌,每天6袋,每袋含酪酸梭菌活菌不低于1.0×107cfu/克、双歧杆菌活菌粉不低于1.0×10~6cfu/克)33例。分别收集66例患者治疗前及治疗后13±1天血清及粪便标本,同时收集30例健康志愿者血清及粪便标本。采用荧光定量PCR检测血清及粪便中HBV DNA、粪便中9种肠道菌群含量。分别对9种肠道菌群DNA拷贝数对数值进行两两间相除获得菌群间比值;酶联免疫吸附试验法检测血清细胞因子(IL-17A~F、IL-1β、IL-6及CXCL-13)的浓度;全自动生化仪检测:总胆红素(TBIL)、白蛋白(ALB)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)及谷氨酰转肽酶(GGT)。对慢性乙型肝炎患者治疗前进行HBV DNA、菌群间比值、血清白介素-17A~F及肝功能变化进行检查并进行相互间相关性分析。比较慢性乙型肝炎患者治疗前后血清/肠道HBV DNA、菌群间比值及血白介素-17A~F变化;对常规治疗组与微生态治疗组间治疗前后上述指标的变化进行比较。结果(一)1.66例慢性乙型肝炎患者治疗前血清来源和粪便来源HBV DNA拷贝数均高于检测下限值。粪便来源与血清来源HBV DNA拷贝数呈正相关(r=0.57)。HBe抗原阳性组粪便HBV DNA拷贝数明显高于e抗原阴性组(P0.05)。粪便来源HBV DNA与碱性磷酸酶(r=-0.41),总胆红素(r=-0.29)呈负相关。抗病毒治疗后血清HBV DNA阴转率与粪便HBV DNA阴转率无差异(P0.05),血清HBV DNA阴转组与粪便HBV DNA阴转组肝功能均明显好转,差异无显著性(P0.05)。2.与健康志愿者相比,66例慢性乙型肝炎患者治疗前,肠杆菌科、肠球菌、梭菌属、白色念珠菌及拟杆菌菌属DNA拷贝数明显增加(P0.05),而双歧杆菌、乳酸杆菌、瘤胃球菌属及普雷沃氏菌属DNA拷贝数明显减少(P0.05)。菌群间比值(大/双、大/乳、大/瘤、粪/双、粪/乳、粪/瘤、梭/双、梭/乳、梭/瘤、白/双、白/乳、白/瘤、拟/双、拟/乳、拟/瘤、大/普、粪/白、粪/拟、粪/普、梭/白、梭/拟、梭/普及白/普)明显增大(P0.05);菌群间比值(大/粪、大/梭及粪/梭)明显减小(P0.05);菌群间比值(大/白、大/拟、粪/拟、白/拟、双/乳、乳/瘤及双/瘤)无明显变化(P0.05)。3.肠道HBV DNA与肠球菌、粪/白、粪/普及粪/瘤呈正相关,与大/粪呈负相关;血清HBV DNA与粪/乳、白/乳及普/乳比值呈正相关,与乳酸杆菌及乳/双呈负相关。4.66例慢性乙型肝炎患者治疗前,肠道菌群及菌群间比值变化与肝功能变化间存在相关性:总胆红素与肠杆菌科、白色念珠菌、瘤胃球菌属、大/双、大/梭、大/拟、粪/双、梭/双、白/双及白/普呈正相关,与双歧杆菌、梭/瘤、拟/瘤及普/瘤呈负相关。其中,总胆红素与大/普及瘤/双呈正相关正相关,相关性最强(r=0.42),与拟/瘤及普/瘤呈负相关,相关性最强(r=-0.34)。白蛋白与大/瘤、乳/双、白/瘤及普/瘤呈正相关,与白色念珠菌、瘤胃球菌属及拟/双呈负相关。其中,白蛋白与梭/瘤呈正相关,相关性最强(r=0.40),与瘤/双间比值呈负相关,相关性最强(r=-0.39)。谷丙转氨酶与肠杆菌科、乳梭杆菌、梭菌属、大/白、大/拟,大/普、粪/拟、粪/普、乳/双、梭/普、梭/拟、白/拟及白/普呈正相关,与白/乳、拟/乳、普/乳、梭/瘤、白/瘤及拟/瘤呈负相关。其中,谷丙转氨酶与瘤胃球菌属呈正相关,相关性最强(r=0.47),与普/瘤呈负相关,相关性最强(r=-0.43)。谷草转氨酶与肠球菌、白色念珠菌、大/双、粪/普、乳/双、梭/双、白/双、瘤/双呈正相关,与双歧杆菌、拟杆菌属、普沃氏菌属、拟/乳、普/乳、拟/普、拟/瘤及普/瘤呈负相关。其中,谷草转氨酶与大/拟、大/普、粪/双、粪/拟、乳/双、梭/拟、梭/普、白/拟及白/普均呈正相关,相关性最强(r0.6),与拟/乳及拟/瘤均呈负相关,相关性最强(r=-0.56)。碱性磷酸酶与大/双、大/拟、粪/拟、梭/双、白/双、普/双、瘤/双、梭/普及白/拟呈正相关,与拟杆菌属及拟/瘤呈负相关。其中,碱性磷酸酶与粪/双呈正相关,相关性最强(r=0.51),与双歧杆菌呈负相关,相关性最强(r=-0.45)。谷氨酰转肽酶与肠球菌、乳酸杆菌、粪/双及乳/双呈正相关,与白/乳及普/乳呈负相关。其中,谷氨酰转肽酶与梭菌属呈正相关,相关性最强(r=0.37),与拟/乳呈负相关,相关性最强(r=-0.28)。5.与健康志愿者相比,66例慢性乙型肝炎患者治疗前血清IL-17A~F含量均明显升高(P0.01);治疗后血清IL-17A~F含量均明显降低(P0.01)。6.治疗前,肠道HBV DNA与IL-17B、IL-17D及IL-17E变化正相关;血清HBV DNA与IL-17A~F变化间均无相关性。7.治疗前,IL-17A与粪/白及粪/瘤呈正相关,IL-17B与瘤/乳呈负相关,IL-17C与大/粪、拟/乳及普/乳呈负相关,IL-1D与粪/双呈正相关。8.治疗前,IL-A~F与IL-1β、IL-6及CXCL-13变化呈正相关。9.治疗前,IL-A~F与总胆红素变化呈负相关;IL-17B及IL-17E与白蛋白变化呈正相关,IL-17C与IL-17E与谷胺酰转肽酶均呈负相关。结果(二)1.微生态治疗组治疗后血清HBV DNA阴转率为33.30%,常规治疗组治疗后血清HBV DNA阴转率为24.24%,两者间比较差异无统计学意义(P0.05);微生态制剂治疗组治疗后粪便HBV DNA阴转率为15.15%,明显低于常规治疗组(30.30%),但两者间比较差异无统计学意义(P0.05)。2.与常规治疗组相比,微生态治疗组患者肠杆菌科、双歧杆菌DNA拷贝数治疗后减少更明显(P0.01),肠球菌治疗后增加更明显(P0.05)。大/粪、大/梭、大/白、大/拟、大/普及大/瘤比值治疗后更减小(P0.05),粪/梭、粪/白、粪/双、粪/乳、粪/瘤、梭/双、白/双及普/双比值治疗后更增大(P0.05)。3.与常规治疗组比较,微生态治疗组治疗后血清IL-17A、IL-17C、IL-17D及IL-17F下降更明显(P0.01)。4.与常规治疗组相比,微生态治疗组患者谷丙转氨酶、谷草转氨酶、谷氨酰转肽酶治疗后改善更明显(P0.05),但总胆红素治疗后上升更明显(P0.05)。结论1.检测慢性乙型肝炎患者粪便来源HBV DNA与血清来源HBV DNA临床意义不完全相同。3.慢性乙型肝炎患者存在IL-17家族各成员表达,多种肠道菌群间动态平衡破坏,两者具有一定的相关性,它们与肝脏损伤存在相关性。8.微生态制剂治疗能促进肝脏细胞损伤的修复。其机制可能与改善肠道菌群间比值紊乱程度,下调IL-17家族成员表达有关。但可能引起新的肠道菌群间动态平衡的破坏及肝脏损害。
[Abstract]:Objective To investigate the changes of serum levels of HBV DNA , IL - 1尾 , IL - 6 and CXCL - 13 in patients with chronic hepatitis B . Compared with healthy volunteers , 66 patients with chronic hepatitis B had significantly decreased copy number ( P0.05 ) . There was positive correlation between serum HBV DNA and stool / milk , white / milk and / or milk / milk ratio . There was a negative correlation between glutamic - pyruvic transaminase ( r = - 0 . 43 ) . There was a negative correlation between IL - 17A and IL - 17E , IL - 17A and IL - 17E in 66 patients with chronic hepatitis B . Conclusion 1 . The expression of HBV DNA in patients with chronic hepatitis B is not exactly the same as that of serum - derived HBV DNA ( P0.05 ) . Conclusion 1 . There is a correlation between the expression of HBV DNA and serum - derived HBV DNA in patients with chronic hepatitis B .

【学位授予单位】：安徽医科大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R512.62

【参考文献】