诊断家畜日本血吸虫感染胶体金免疫层析试纸条的研制

发布时间：2019-03-02 14:42

【摘要】：目的研制一种可用于疫区现场快速诊断家畜日本血吸虫感染的胶体金免疫层析试纸条。方法设计重组蛋白G并在大肠杆菌中表达,得到重组蛋白。对重组蛋白G进行胶体金标记并制备金标垫,分别用可溶性虫卵抗原(SEA)和重组蛋白G划线,作为检测线和质控线。采用组装的试纸条检测标准阴、阳性BALB/c鼠与新西兰大白兔血清,以及粪检阴、阳性的绵羊与水牛血清,评估其灵敏度和特异度;利用组装的试纸条检测前后盘吸虫病病牛血清,评价其交叉反应性。结果成功构建了重组蛋白G的原核表达质粒并在大肠杆菌中表达。以重组蛋白G制备的试纸条可用于检测日本血吸虫感染BALB/c鼠、新西兰大白兔、水牛、绵羊血清抗体。该试纸条检测日本血吸虫感染小鼠与兔血清的灵敏度、特异度均为100%;检测绵羊血清的灵敏度为100%,特异度为88.46%;检测水牛血清的灵敏度为94.44%,特异度为100%;其与前后盘吸虫交叉反应率为5.88%。结论成功研制能检测多种家畜血吸虫病的胶体金免疫层析试纸条,其检测家畜血吸虫感染的灵敏度和特异度均较高。
[Abstract]:Objective to develop a colloidal gold immunochromatographic assay strip for rapid diagnosis of schistosoma japonicum infection in domestic animals in epidemic areas. Methods the recombinant protein G was designed and expressed in E. coli. The recombinant protein G was labeled with colloidal gold and prepared gold-labeled pad. The soluble egg antigen (SEA) and recombinant protein G were used as the detection line and the quality control line, respectively. The sensitivity and specificity of standard negative, positive BALB/c mouse and New Zealand white rabbit serum, fecal negative test and positive sheep and buffalo serum were evaluated by using assembled test strip. The cross-reactivity of bovine sera from patients with and without paragonimiasis was evaluated by using assembled test strips. Results the prokaryotic expression plasmid of recombinant protein G was successfully constructed and expressed in E. coli. The test strips prepared with recombinant protein G can be used to detect the serum antibodies against Schistosoma japonicum infected BALB/c mice, New Zealand white rabbits, buffalo and sheep. The sensitivity and specificity of the test strip were 100%, 88.46% and 100%, respectively, for the sera of mice infected with Schistosoma japonicum and rabbits, and for sheep sera, the sensitivity and specificity were 100% and 88.46%, respectively. The sensitivity and specificity of detection of buffalo serum were 94.44% and 100% respectively, and the cross-reaction rate was 5.88%. Conclusion Colloidal gold immunochromatographic assay strip can be successfully developed to detect schistosomiasis in domestic animals. The sensitivity and specificity of the strip for detecting Schistosoma japonicum infection in domestic animals are high.
【作者单位】：中国农业科学院上海兽医研究所、农业部寄生虫学重点开放实验室、国家防治动物血吸虫病专业实验室;江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心;上海市徐汇区中心医院检验科;
【分类号】：R532.21

【参考文献】

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2 曹之舫;武建国;;链球菌蛋白G——一种优于葡萄球菌蛋白A的IgG结合物[J];国外医学(微生物学分册);1989年05期

3 周帅锋;余路新;汪世平;;血吸虫病的诊断检测技术及研究进展[J];热带医学杂志;2009年03期

4 王福安,张太和;链球菌G蛋白——一种新型、广谱的免疫检测剂[J];上海免疫学杂志;1989年03期

5 喻鑫玲;何永康;杨瑞清;罗新松;赵雅琴;李岳生;;胶体金SPA双联抗体检测试纸条法诊断日本血吸虫病的初步研究[J];实用预防医学;2006年03期

6 何伟,朱荫昌,华万全,刘韵娟;血吸虫病快速免疫诊断──胶体染料试纸条法的研究[J];中国血吸虫病防治杂志;2000年01期

7 张世微;程斌;渠洪捷;陈仲民;邹琴;褚丽平;张琳;何焕然;汤胜华;黄小平;杨红梅;;胶体染料试纸条法用于血吸虫病低度流行区筛查效度评价[J];中国血吸虫病防治杂志;2010年02期

8 林矫矫;胡述光;刘金明;;中国家畜血吸虫病防治[J];中国动物传染病学报;2011年03期

9 贺昕,熊晓东,梁敬博,李治宇,张曦;免疫检测用纳米胶体金的制备及粒径控制[J];稀有金属;2005年04期

10 蒋守富;张小萍;李宝良;何艳燕;刘静;唐月红;马晓疆;蔡黎;;微量血清血吸虫抗体检测层析卡的研制与评价[J];中国血吸虫病防治杂志;2013年01期

【共引文献】

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3 陈玲;江仁华;范宏萍;;IHA与ELISA法在检测慢性日本血吸虫病中的应用比较[J];公共卫生与预防医学;2012年03期

4 徐欢;董斌;林月霞;田素娟;杜欣娥;;纳米胶体金的制备及粒径的测定[J];广东药学院学报;2010年02期

5 ;Application of Colloidal Gold to Fluorophotometric Determination of Human IgG[J];Chemical Research in Chinese Universities;2010年01期

6 高艳春,李爱菊,范小林,邱承洲,张熊禄,胡乔生;血吸虫的检测与血吸虫病的诊断[J];赣南师范学院学报;2005年03期

7 刘斌;毛斌;宋玉哲;王运福;刘国汉;;还原剂参量对金纳米颗粒的影响[J];甘肃科学学报;2009年02期

8 郭俭;郭家钢;;血吸虫病早期免疫诊断的研究进展[J];国外医学(寄生虫病分册);2005年06期

9 鞠川;冯正;胡薇;;日本血吸虫病免疫诊断方法的研究进展[J];国际医学寄生虫病杂志;2006年05期

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3 周玮;李小红;曹建平;;血吸虫分子诊断抗原的研究[J];国际医学寄生虫病杂志;2006年06期

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