PCR结合反向斑点杂交在侵袭性肺曲霉病早期诊断中的价值

发布时间：2020-02-03 20:50

【摘要】：目的评价和比较血清半乳甘露聚糖(GM)浓度测定和PCR结合反向斑点杂交实验在侵袭性肺曲霉病(IPA)早期诊断中的临床价值。方法用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清中GM的浓度;PCR结合反向斑点杂交法检测各组小鼠血清、肺泡灌洗液、肺组织中的曲霉菌DNA。结果 ELISA法测定GM浓度中,实验组血清、BALF的GM实验敏感性、特异性与对照组间差异有统计学意义(P0.05);反向斑点杂交检测血清、肺泡灌洗液、肺组织中曲霉菌DNA含量,实验组阳性率明显高于对照组(P0.05)。用血清标本的反向斑点杂交实验与GM实验、组织病理阳性率进行比较,组织病理的阳性率最高,其次是反向斑点杂交。三种方法的差别均有统计学意义(P0.05)。结论 GM-ELI-SA检测是一项较灵敏、快速的诊断方法,反向斑点杂交实验在IPA早期诊断上的作用优于GM实验。
【图文】：

January2016，Vol.16，No.01究的界值。2.2GM测定结果实验组血清和BALF标本各56份，在感染曲霉菌第1d阳性者为22例,第3d阳性者28份，第5d阳性者为28份，其中BALF的阳性率高于血清。阴性对照组血清与BALF的GM值均为阴性，实验组与对照组间阳性率差异有统计学意义（P<0.05）。实验组感染后ld、3d、5d肺泡灌洗液GM均值呈升高趋势。实验组相同感染天数大鼠肺泡灌洗液GM值明显高于血清GM值（P<0.05）。2.3标本反向斑点杂交结果烟曲霉菌标本染色后显色明显，为阳性；黑曲霉、黄曲霉及土曲霉标本染色后未显色，为阴性,见图1。阳性对照组Positivecontrolgroup烟曲霉菌Aspergillus黑曲霉Aspergillusniger黄曲霉Aflatoxin土曲霉Aspergillusterreus图14种曲霉菌标本反向斑点杂交结果Fig.1Resultsofreversedotblothybridizationin4kindsofAspergillusspecimens2.4不同标本反向斑点杂交阳性率的比较将收集的血清、BALF、肺组织标本提取DNA并扩增后进行反向斑点杂交实验，实验组阳性率明显高于对照组，差异有统计学意义（P<0.05）。随着感染时间的延长，标本阳性率逐渐上升，肺组织的阳性率高于BALF高于血清，用血清标本的反向斑点杂交实验与GM实验、组织病理阳性率进行比较，组织病理的阳性率最高，其次是反向斑点杂交，三种方法的差别有统计学意义（P<0.05）,见表2，表3，表4。组别Group实验组Experimentalgroup第1d第3d第5d对照组Controlgroup总标本数Total20191715反向斑点杂交PCR△12（60.86%）15（78.94%）16（94.12%）0GM实验GM-ELISA※8（20.00%）10（52.63%）12（70.59%）0组织病理Tissuepathology＃20（100%）19（100%）17（100%）1（6.7%）表2

January2016，Vol.16，No.01究的界值。2.2GM测定结果实验组血清和BALF标本各56份，在感染曲霉菌第1d阳性者为22例,第3d阳性者28份，第5d阳性者为28份，其中BALF的阳性率高于血清。阴性对照组血清与BALF的GM值均为阴性，实验组与对照组间阳性率差异有统计学意义（P<0.05）。实验组感染后ld、3d、5d肺泡灌洗液GM均值呈升高趋势。实验组相同感染天数大鼠肺泡灌洗液GM值明显高于血清GM值（P<0.05）。2.3标本反向斑点杂交结果烟曲霉菌标本染色后显色明显，为阳性；黑曲霉、黄曲霉及土曲霉标本染色后未显色，为阴性,见图1。阳性对照组Positivecontrolgroup烟曲霉菌Aspergillus黑曲霉Aspergillusniger黄曲霉Aflatoxin土曲霉Aspergillusterreus图14种曲霉菌标本反向斑点杂交结果Fig.1Resultsofreversedotblothybridizationin4kindsofAspergillusspecimens2.4不同标本反向斑点杂交阳性率的比较将收集的血清、BALF、肺组织标本提取DNA并扩增后进行反向斑点杂交实验，实验组阳性率明显高于对照组，差异有统计学意义（P<0.05）。随着感染时间的延长，标本阳性率逐渐上升，肺组织的阳性率高于BALF高于血清，用血清标本的反向斑点杂交实验与GM实验、组织病理阳性率进行比较，组织病理的阳性率最高，，其次是反向斑点杂交，三种方法的差别有统计学意义（P<0.05）,见表2，表3，表4。组别Group实验组Experimentalgroup第1d第3d第5d对照组Controlgroup总标本数Total20191715反向斑点杂交PCR△12（60.86%）15（78.94%）16（94.12%）0GM实验GM-ELISA※8（20.00%）10（52.63%）12（70.59%）0组织病理Tissuepathology＃20（100%）19（100%）17（100%）1（6.7%）表2

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