运用噬菌体治疗常见耐药细菌引起的感染

发布时间：2020-03-22 13:32

【摘要】：抗生素广泛使用导致的多重耐药问题日益严重。耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)和耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌(carbapenem-resistant Acinetobacter baumannii,CRAB)是两种代表性的多重耐药菌。这两种多重耐药菌,临床上的分离率较高,治疗困难,会导致各种院内及社区感染,比如皮肤感染、肺部感染、菌血症或败血症。为了解决这个困境,需要寻找新的治疗方案。噬菌体是一种能够感染并杀死细菌的病毒,具有专一性强的特点。具有替代抗生素治疗感染的潜力。本课题从污水中分离得到两株新报道的噬菌体,分别是金黄色葡萄球菌噬菌体SH-St 15644和鲍曼不动杆菌噬菌体SH-Ab 15599,并深入研究了这两株噬菌体的生物学特性和基因组。电镜结果显示SH-St 15644为长尾噬菌体,SH-Ab 15599则为肌尾噬菌体。SH-St 15644能够裂解37株MRSA临床分离株中的12株(32%),SH-Ab 15599则能够裂解51株CRAB临床分离株中的15株(29.4%)。SH-St 15644和SH-Ab 15599对热和酸碱的耐受性都比较好;SH-St 15644与宿主菌共培养4 min后,吸附率约80%;其潜伏期约12 min,裂解期约9 min,增殖量约13 PFU/infected cell。SH-Ab 15599与宿主菌共培养5 min后,吸附率约90%;其潜伏期约10min,裂解期约20 min,增殖量约43 PFU/infected cell。在体外杀菌实验中,两株噬菌体都有很好的杀菌效果。基因组分析结果显示,SH-St 15644的基因组为双链线性DNA,长45111 bp,GC含量为33.35%。SH-Ab15599的基因组也是双链线性DNA,含143204个碱基对,GC含量为38.45%。两个噬菌体的基因组都不含有已知的耐药基因及毒力基因。之后,为了进一步研究噬菌体疗法,建立了裸鼠皮肤脓肿模型并运用噬菌体SH-St 15644治疗MRSA引起的皮肤感染。实验结果显示,噬菌体治疗组裸鼠的皮肤脓肿面积、菌落计数都小于MRSA感染组。病理结果显示,噬菌体治疗组皮肤组织结构的破坏程度较MRSA感染组轻。实验证明,噬菌体SH-St 15644能够有效抑制MRSA引起的皮肤感染。综上所述,本课题对新分离噬菌体SH-St 15644和SH-Ab 15599的生物学特性、基因组学以及通过皮肤脓肿模型,对SH-St 15644抗MRSA皮肤感染效果进行研究分析。证明了噬菌体疗法的潜力,为以后这两株噬菌体的临床应用建立了基础,提供了保障。
【图文】：

噬菌体SH-St15644的噬菌斑Fig.2-1PlaquemorphologyofSH-St15644

19图 2-2 噬菌体 SH-St 15644 的透射电镜图Fig.2-2 Transmission electron micrograph of SH-St 15644菌体 SH-St 15644 的宿主谱过点滴法，共检测了 37 株临床 MRSA 分离株，其中 12 株（32%）能够被裂解（表 2-1）。表明了 SH-St 15644 在治疗 MRSA 感染上的潜力，对临床SA 分离株有较广的裂解谱。
【学位授予单位】：上海交通大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R515

【参考文献】

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1 青宁生;;我国第一位细菌学博士——余[J];微生物学报;2007年06期

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本文编号：2595110