TRIM蛋白家族在结核性胸膜炎诊断和结核病感染中的作用研究

发布时间：2020-03-26 14:04

【摘要】：结核分枝杆菌(Mycobacteriumtuberculosis,M.tb)是胞内感染菌,宿主的天然免疫反应一直在抗击结核感染中起着至关重要的作用。三结构域蛋白(tripartite motif,TRIM)家族可作为免疫调节蛋白参与机体的天然免疫应答,并且可以通过多种方式调控天然免疫的信号通路,其异常表达与许多疾病的发生有关,例如病毒感染、肿瘤和自身免疫性疾病等。最新的研究发现TRIM家族的一些成员在潜伏结核感染和活动性肺结核人群中具有差异性表达。并且它们的表达在活动性肺结核患者中被下调。另一方面,有研究表明TRIM蛋白家族部分成员的过表达可促进肿瘤细胞的迁移和增殖。目的:筛查可能在结核性胸腔积液和恶性胸腔积液中表达存在差异的TRIM蛋白家族成员,验证其作为结核性胸膜炎诊断及鉴别诊断辅助检查手段的可能性。同时,探讨TRIM4、16、27、32、35、46、47、65、68 9个基因在结核感染中的调控作用。方法:基于先前研究的基础,本研究首次采用实时荧光定量聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)的方法对 TRIM 蛋白家族中 TRIM4、16、27、32、35、46、47、65、68这9个蛋白在结核性胸腔积液和恶性胸腔积液中mRNA的表达水平进行了全面系统的分析。随后进一步使用模式菌株耻垢分枝杆菌(Mycobacterium smegmatis,M.sm)感染体外巨噬细胞系THP-1,构建细胞感染模型,进一步验证这9个TRIM基因的表达变化。结果:本研究共纳入53例受试者,其中包括结核性胸腔积液患者32例、恶性胸腔积液患者21例。结核性胸腔积液TIRM16基因的表达量为0.0077,明显低于恶性胸腔积液(0.0000988),p0.0001。其余TRIM蛋白基因表达水平两组间差异五统计学意义。受试者操作特性曲线(Receive operating characteristic,ROC)分析TRIM16的诊断效果显示其具有较好的准确性,曲线下面积(Area under the curve,AUC)为 0.937。体外感染细胞实验发现,TRIM35、TRIM46、TRIM65和TRIM68这4个基因在表达水平上表现出了相同的趋势,即在感染了耻垢分枝杆菌30min后就出现了明显的下调,在感染后2h和感染后3h开始轻微回调随即又开始逐渐下降一直延续到感染后12h又开始逐渐上升。结论:TRIM16基因在结核性胸腔积液患者中的表达量明显低于恶性胸腔积液患者,ROC曲线分析TRIM16的诊断效果显示其具有较好的准确性,表明,TRIM16基因在结核性胸膜炎的诊断与鉴别诊断中可能具有一定的潜在价值。结核分枝杆菌的模式菌株耻垢分枝杆菌感染体外巨噬细胞系THP-1后,TRIM35、TRIM46、TRIM65和TRIM68 4个基因表达量的变化存在一定的意义,提示其与结核感染过程可能有关。
【图文】：

逡逑图２．２实时荧光定量ＰＣＲ扩增曲线、溶解曲线和相对标准曲线图逡逑２．邋３．邋３．邋２在结核性胸腔积液和恶性胸腔积液中ＴＲＩＭ基因差逡逑异表达的情况逡逑在此之前，我们实验室研究了健康人群、潜伏感染人群、活动性肺结核人群逡逑三者间外周血样本中７２个ＴＲＩＭ基因的ＲＮＡ表达水平，结果发现相较于健康逡逑人群和潜伏感染人群，总共有２０个基因在活动性肺结核患者中的表达明显降低。逡逑这些基因在分类上大多数属于ＴＲＩＭ－Ｃ－ＩＶ亚类，其余分别属于ｃ－ｖｎ亚类，Ｃ－Ｉ逡逑亚类，Ｃ－Ｖ、Ｃ－Ｘ亚类。我们选取其中差异性最大９个基因，以Ｐ＜０．０５为标准，逡逑发现在这其中ＴＲＭ１６基因在结核性胸腔积液和恶性胸腔积液中的表达最有意逡逑义，其在结核性胸腔积液中下降，恶性胸腔积液中表达上调，而从分类上来看，逡逑ＴＲＭ１６属于未分类的ＴＲＩＭ基因。结果见表２．２．和图２．２．逡逑表２．２结核性胸腔积液患者和恶性胸腔积液患者间ＴＲＩＭ基因的表达水平逡逑ＴＲＩＭ基因逦结核组（ｎ＝３２）逦肿瘤组（ｎ＝２１）

图２．邋３邋ＴＲＩＭ１６基因用于鉴别良恶性胸腔积液的ＲＯＣ曲线逡逑
【学位授予单位】：北京市结核病胸部肿瘤研究所
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R521.7

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1 王雅;TRIM蛋白家族在结核性胸膜炎诊断和结核病感染中的作用研究[D];北京市结核病胸部肿瘤研究所;2019年

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本文编号：2601546