慢性乙型肝炎肝脏炎症和纤维化中细胞色素C、Caspase-3变化影响的研究

发布时间：2020-04-13 07:28

【摘要】：背景乙型病毒性肝炎具有传播途径复杂,传染性强,发病率高等特点。不仅可以引起急性肝炎、慢性肝炎,而且与肝纤维化、肝癌的发生和发展密切相关。慢性乙型肝炎的反复发作,经久不愈,可转变为肝纤维化(LF)。肝细胞损伤与坏死对周围非实质细胞的不断刺激是肝纤维化持续发展的关键点,导致细胞外基质的大量合成和沉积,超过了肝脏细胞的降解速度,造成了肝组织结构的破坏和重建,最后发展为肝硬变。由于有凋亡相关基因、肝炎病毒、细胞分子、自身免疫等多种因素参与,迄今为止乙型病毒性肝炎的治疗仍是当今世界面临的难点和热点。乙型肝炎病毒(HBV)侵入机体,不仅感染宿主的肝细胞,同时参与激活细胞毒T淋巴细胞(CTL),通过直接损害或通过免疫反应引起肝细胞凋亡或坏死。肝细胞凋亡是一个多基因调控的复杂过程,各基因能通过某些中间环节相互影响,共同影响凋亡的实施。各种细胞因子(如细胞色素C.Caspase-3.血清肿瘤坏死因子)通过复杂的调节机制在病毒性肝炎、细胞凋亡、肝纤维化的进展中起着重要作用。以往人们并不认为凋亡在纤维化生成中起作用,对引起肝纤维化发生的肝损伤因素的研究多集中于肝细胞坏死方面,很少注意到同时伴发的肝细胞凋亡及它在肝纤维化发病机制中的作用,然而事实上肝纤维化过程中涉及了凋亡反应。肝细胞的凋亡是双向的,它是机体对抗肿瘤、感染及防止自身免疫反应的保护措施,但大量的肝细胞凋亡常伴有肝细胞坏死,可引起肝脏结构改变与功能的损伤。防止肝细胞的凋亡,可以预防坏死。凋亡抑制剂可用于干预肝纤维化的发展。肝细胞凋亡可影响肝脏炎症和纤维化,但是然而在不同程度下肝脏纤维化和炎症之间变化关系对细胞凋亡影响如何,目前报道较少。细胞色素C及Caspase一3是内源性、外源性凋亡途径的重要细胞凋亡因子,本研究从分子水平对此疾病进行研究,以期通过研究细胞色素C. Caspase-3在慢性乙型病毒性肝炎患者不同病理分级和分期的表达情况,通过肝脏炎症分级和纤维化分期影响两种凋亡因子,以期更深一步了解肝脏病理进程中肝细胞凋亡的信号转导变化,分析内源性凋亡途径和外源性凋亡途径在慢性乙型肝炎中的地位和意义,为慢性乙型肝炎治疗提供理论基础。目的观察比较细胞色素C和Caspase-3在乙型病毒性肝炎不同分级分期中的表达情况,探讨两种因子在不同肝脏炎症活动程度和纤维增生程度中的变化规律。方法 1.病例收集：收集2010年6月至2012年12月在郑州大学第一附属医院感染科确诊为乙型病毒性肝炎并同期进行肝组织病理学检查的病例,排除合并其他疾病如其他病毒性肝炎、肝硬化失代偿期、酒精性肝病、脂肪肝、自身免疫性肝炎、原发性胆汁性肝硬化、肝癌；或合并严重的心、脑、肺、肾等脏器实质性病变。另选用10例正常肝组织做对照。 2.实验方法：根据病理科医师诊断的不同分级分期,取肝脏活组织标本制作蜡块,进行苏木素-伊红HE染色,采用免疫组织化学SP法,检测细胞色素C和Caspase-3在肝脏的表达水平,采集图像后采用软件分析系统计算平均灰度值。 3.统计学分析：采用SPSS17.0与EXCEL2007统计软件进行数据分析。采用秩和检验比较不同病理分级分期凋亡因子表达的差异性,采用Spearman等级相关分析法判断肝细胞凋亡因子与肝脏病理学分级之间的相关性。结果 1.细胞色素C、Caspase-3在慢性乙型病毒性肝炎肝组织中的阳性表达率分别为73%、68.5%,在正常肝组织中的阳性表达率分20%、20%。经统计学分析均有显著差异(P0.005)。 2.炎症分级G0、G1、G2、G3、G4间的细胞色素C表达水平经秩和检验提示5组炎症分级之间细胞色素C表达水平的差别有统计学意义(P0.05)。在同一纤维化分期下5组炎症分级之间细胞色素C表达水平的差别具有统计学意义(P0.05)。 3.纤维化分期S0、S1、S2、S3、S4间的细胞色素C表达水平经秩和检验提示5组纤维化分期之间细胞色素C表达水平的差别有统计学意义(P0.05)。在同一炎症分级下5组纤维化分期之间的细胞色素C表达水平的差别具有统计学意义(P0.05)。 4.炎症分级G0、G1、G2、G3、G4间的Caspase-3表达水平经秩和检验提示5组炎症分级之间Caspase-3表达水平的差别有统计学意义(P0.05)。在同一纤维化分期下5组炎症之间的Caspase-3表达水平的差别具有统计学意义(P0.05)。 5.纤维化分期S0、S1、S2、S3、S4间的Caspase-3表达水平经秩和检验提示5组纤维化分期之间Caspase-3表达水平的差别有统计学意义(P0.05)。在同一炎症分级下5组纤维化分期之间Caspase-3表达水平的差别具有统计学意义(P0.05)。 6.慢性乙型病毒性肝炎患者肝组织中细胞色素C、Caspase-3的表达存在明显的相关性(P0.05)。 7. Logistic回归分析显示：肝脏炎症和纤维化都是肝细胞凋亡危险因素。结论不同肝脏病理分级细胞色素C的表达水平不同,细胞色素C与肝脏的炎症活动度和纤维化程度相关；同时不同肝脏病理分级Caspase-3的表达水平不同,Caspase-3与肝脏的炎症活动度和纤维化程度相关,表明在慢性乙型肝炎中,随着炎症或者纤维化程度级别递增,都对外源性凋亡途径及内源性凋亡途径有明显促进作用,因此内源性及外源性凋亡途径在肝脏病理进展中可能起重要作用,为临床治疗提供理论依据。
【学位授予单位】：郑州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R512.62;R575.2

【参考文献】