【摘要】：目的探讨诱导痰上清液和血液中1-3-β-D葡聚糖(1-3-β-D glucan,BG)、Ⅱ型肺泡细胞表面抗原(krebs von den lungen-6,KL-6)、BG/KL-6、白细胞介素-8(interleukin-8,IL-8)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和白细胞介素-4(interleukin-4,IL-4)对艾滋病(AIDS)相关肺孢子菌肺炎(pneumocystis pneumonia,PCP)的临床诊断价值,确定相对合适的诊断界值,并初步了解BG、KL-6动态变化与AIDS相关PCP临床疗效的相关性。方法1.纳入杭州市西溪医院2016年6月~2017年7月住院的AIDS合并PCP确诊患者(经病原学染色和/或分子生物学等方法结合临床表现确诊)27例,疑诊患者(仅有临床表现)14例,定植患者(仅分子生物学方法表现阳性)8例,无PCP的AIDS患者20例作为研究对象。其中经综合治疗后有AIDS合并PCP确诊患者22例,疑诊患者5例,定植患者6例。分别留取患者入院时、治疗7天后的诱导痰标本及血标本。采用动态浊度法检测各组诱导痰上清液、血浆中BG含量,ELISA方法测定KL-6、IL-8、IL-6、TNF-α、IL-4含量。同时搜集并分析患者基线资料及实验室指标,如性别、年龄、基础疾病、CD4+T、LDH、CRP、PCT、Pa O2、白细胞计数、HIV-1病毒载量、胸部影像学检查、治疗情况等。2.分别将各组痰上清液及血液中BG、KL-6、BG/KL-6、IL-8、IL-6、TNF-α和IL-4与耶氏肺孢子菌(pneumocystis jeroveci,PJ)检测情况和患者临床表现进行对比,综合分析BG、KL-6敏感度、特异度,确定相对合适的诊断界值,探索BG联合KL-6检测在AIDS合并PCP诊断中的应用价值。3.比较治疗前后患者痰上清液、血液中BG、KL-6的动态变化,并与PJ检测情况及临床疗效情况对比,探讨其对PCP治疗效果的评估价值。4.采用SPSS19.0统计分析软件进行统计分析处理。结果1.AIDS合并PCP患者治疗前诱导痰上清液中确诊组BG浓度高于疑诊组、定植组和对照组,其中确诊组和定植组、确诊组和对照组比较差异有统计学意义(P=0.032,P=0.008);痰上清中KL-6浓度为确诊组疑诊组定植组对照组,其中确诊组和对照组比较差异有统计学意义(P=0.035);4组痰上清中IL-8、IL-6、TNF-α、IL-4、BG/KL-6比较差异均无统计学意义(P0.05)。2.AIDS合并PCP患者治疗前血浆确诊组BG浓度高于疑诊组、定植组和对照组,其中确诊组和对照组比较差异有统计学意义(P=0.000);血清KL-6浓度确诊组疑诊组对照组定植组,差异有统计学意义(P=0.045);4组血清中IL-8、IL-6、TNF-α、IL-4、BG/KL-6比较差异均无统计学意义(P0.05)。3.痰上清、血浆BG诊断AIDS合并PCP的曲线下面积(AUC)为0.729(95%CI 0.582~0.876,P=0.009)、0.756(95%CI 0.592~0.919,P=0.008),最佳临界值为17.55 pg/m L、4.20 pg/m L,敏感度(Se)为52.0%、66.7%,特异度(Sp)为90.0%、86.7%,阳性预测值(PPV)为86.7%、89.9%,阴性预测值(NPV)为60.0%、61.9%。痰上清和血清KL-6诊断AIDS合并PCP的AUC为0.735(95%CI 0.585~0.885,P=0.007)、0.625(95%CI 0.443~0.807,P=0.194),最佳临界值为120.65 U/m L、139.89 U/m L,Se、Sp、PPV、NPV分别为56.0%和66.7%,85.0%和62.5%,82.4%和72.7%,60.7%和52.9%。痰上清和血液BG联合KL-6诊断AIDS合并PCP时AUC为0.810(95%CI 0.686~0.934,P=0.000)、0.411(95%CI 0.224~0.599,P=0.356),Se、Sp、PPV、NPV分别为76.0%和45.8%,75.0%和60.0%,79.2%和64.7%,71.4%和40.9%。4.治疗7天后,痰上清确诊组BG下降比率为74.80%,治疗前后比较差异有统计学意义(P=0.004);疑诊组和定植组BG无变化,差异无统计学意义(P0.05)。痰上清KL-6确诊组、疑诊组和定植组下降比率分别为85.30%、17.60%和44.80%,其中确诊组治疗前后比较差异有统计学意义(P=0.000),疑诊组和定植组差异无统计学意义(P0.05)。血浆BG确诊组、定植组治疗7天后下降比率分别为64.80%、8.60%,疑诊组水平不变,其中确诊组治疗前后比较差异有统计学意义(P=0.003),疑诊组和定植组前后差异均无统计学意义(P0.05)。血清KL-6确诊组、疑诊组和定植组下降比率分别为13.50%、15.10%和15.80%,各组前后差异均无统计学意义(P0.05)。结论1.诱导痰上清液中BG、KL-6及血浆BG可用以辅助诊断AIDS合并PCP,其中痰上清BG可以区分PCP确诊和PJ定植。2.痰上清中BG联合KL-6诊断AIDS合并PCP效果优于单独BG或KL-6。3.PCP确诊患者痰上清中BG、KL-6及血浆BG均能反映病情变化。
【图文】：
肺孢子菌六甲基四胺银染色（1000×）
图 1 肺孢子菌六甲基四胺银染色（1000×）2. pAZ102 基因扩增部分 pAZ102 基因 PCR 扩增电泳结果如图 2 所示，，阳性样品在 500 bp 左右有目的条带，阴性样品及对照未见任何 DNA 条带。
【学位授予单位】：浙江中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R512.91;R563.1
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1 胡e
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