MicroRNA133b通过调节CTGF抑制血吸虫病肝纤维化
【图文】：
研究表明活化的 HSC 对血吸虫病肝纤维化至关重要，为了探究 miR-133b 在HSC 中的表达水平，我们选用人源肝星状细胞 LX-2 细胞为研究对象。因为 TGF-β1 是激活 HSC 的重要细胞因子，所以我们使用 TGF-β1 刺激 LX-2 细胞，体外模拟活化的 HSC。实验中使用 TGF-β1（15ng/mL）处理 LX-2 细胞 0h、12h、24h和 48h。如图 4.1A 所示，随着处理时间的延长 miR-133b 的表达逐渐下降，0h 与24h、48h 小时比较有显著差异（P㩳0.05），24h 和 48h 之间没有显著性差异，以24h 做为后续实验的最佳处理时间。使用浓度为 0ng/mL、5ng/mL、10ng/mL 和15ng/mL 的 TGF-β1 处理 LX-2 细胞 24h。如图 4.1 B 所示，miR-133b 的表达被TGF-β1 持续下调，0ng/mL 与 10ng/mL 和 15ng/mL 比较有显著差异（P㩳0.05），10ng/mL 和 15ng/mL 之间没有显著性差异，以 10ng/mL 做为后续实验的最佳刺激浓度。说明经不同浓度不同时间的 TGF-β1 处理 LX-2 后 miR-133b 的表达显著下调（图 4.1）。
图 4.2 qRT-PCR 检测 LX-2 细胞中 miR-133b 的表达Fig.4.2 The expression of miR-133b in LX-2 cell was detected by qRT-PCR##: P<0.01 vs PBS group and TGF-β1group and TGF-β1+miR-133b mimics NC group4.2 上调 miR-133b 对 TGF-β/SMAD 通路相关分子的影响因为 TGF-β/Smad 信号通路是激活 HSC，促进纤维化的重要信号途径，，为了探究 miR-133b 是否涉及 TGF-β/Smad 信号通路，我们将细胞随机分为六组：空白对照组(PBS 组)、TGF-β1 组、TGF-β1+ miR-133b inhibitor negative control 组TGF-β1+ miR-133b inhibitor 组、TGF-β1+ miR-133b negative control mimics 组和TGF-β1+miR-133bmimics 组，检测 LX-2 细胞中 TGF-β1、Smad3、CTGFmRN的表达。结果显示，与 PBS 组比较，TGF-β1 组、阴性对照组及抑制剂组均显著上调 TGF-β1、Smad3、CTGFmRNA 的表达水平（P㩳0.05）；与 TGF-β1 组、阴性对照组及抑制剂组比较，过表达miR-133b则显著抑制CTGF的表达（P㩳0.05）而对 TGF-β1 及 Smad3 的表达无显著影响（图 4.3-图 4.5）。
【学位授予单位】：南华大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R532.21;R575.2
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