Tollip及TLR4在骨关节结核患者外周静脉血的异常表达及机制探讨

发布时间：2020-07-05 18:16

【摘要】：目的:通过对骨关节结核病人外周静脉血进行细胞免疫荧光技术、流式细胞技术和RT-PCR(reverse transcription Polymerase Chain Reaction)和实时荧光定量PCR检测巨噬细胞重组人Toll样蛋白相互作用蛋白(Recombinant Human Toll Interacting Protein,Tollip)和Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)含量表达差异,并进行统计学分析。探讨Tollip及TLR4含量表达差异在骨关节结核病人免疫应答中的可能作用机制。方法:选取2017年10月至2019年1月,右江民族医学院附属医院和百色市人民医院收治住院的30例骨关节结核患者(胸椎结核11例,腰椎结核14例,膝关节结核5例);同期选取30例在右江民族医学院附属医院及百色市人民医院体检中心行健康体检的正常人(正常组)。对两组分别采用细胞免疫荧光技术检测Tollip蛋白和TLR4蛋白表达水平;流式细胞技术检测Tollip蛋白和TLR4蛋白表达水平;实时荧光定量PCR检测巨噬细胞的Tollip信使核糖核酸(Messenger RibonucleicAcid,mRNA)和TLR4mRNA含量表达差异。比较两组间含量表达差异。结果:骨关节结核组RT-PCR和实时荧光定量PCR测定TLR4 mRNA和Tollip mRNA结果为:TLR4 mRNA相对表达量平均为21.537±0.823,TLR4ΔCt10.622±1.447,Tollip mRNA相对表达量平均为21.453±1.211,Tollip mRNAΔCt 10.694±1.391。健康体检组为:TLR4 mRNA相对表达量平均为21.457±0.470,TLR4ΔCt为10.617±1.389,Tollip mRNA相对表达量平均为21.573±0.707,Tollip mRNAΔCt 10.452±1.546,算出骨关节结核组与健康体检组的各项值分别为TLR4 average t=0.462、TLR4ΔCt t=0.014、Tollip average t=0.477、TollipΔCt t=0.637.TLR4 average P=0.646、TLR4ΔCt t=0.989、Tollip average t=0.635、Tollip 1ΔCt t=0.527,其P值均0.05,无统计学意义。骨关节结核组通过流式细胞术检测TLR4蛋白和Tollip蛋白阳性率的均数和加减标准差为:TLR4为1.40±0.63、Tollip 5.38±1.99。健康体检组为:TLR4为0.40±0.26、Tollip 1.40±0.53,TLR4阳性率t为-10.588,Tollip阳性率t为-8.075。TLR4阳性率P值为0.000,Tollip阳性率为0.000,均小于0.05,提示骨关节结核组TLR4蛋白和Tollip蛋白阳性率明显高于健康体检组,有统计学意义P0.05;骨关节结核组通过细胞免疫荧光技术检测TLR4蛋白、Tollip蛋白表达水平,发现骨关节结核组中TLR4蛋白数量较健康体检组多,同时亮度明显高于健康体检组。骨关节结核组中Tollip蛋白和健康体检组相比数量较多,亮度也较亮。同样还发现骨关节结核组中TLR4蛋白为高亮度红色荧光的巨噬细胞中Tollip蛋白区域蓝色荧光亮度明显较暗,而TLR4蛋白为暗亮度红色荧光的巨噬细胞中Tollip蛋白区域蓝色荧光亮度明显较亮。结论:本研究揭示骨关节结核患者在感染结核后TLR4蛋白和Tollip蛋白表达可增高。本研究初步探讨了骨关节结核患者外周静脉血中巨噬细胞表面TLR4过度异常表达并可能存在Tollip负反馈调控作用的关系,但其具体作用机制尚未明确。
【学位授予单位】：右江民族医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R529.2
【图文】：

图 2-1 骨关节结核组与健康体检组 TLR4 蛋白、Tollip 蛋白二维图ure 2-1 Two-dimensional map of TLR4 protein and Tollip protein in osteoartictuberculosis group and healthy examination group结核组通过细胞免疫荧光技术检测 TLR4 蛋白、Tollip 蛋白结果。4 蛋白、Tollip 蛋白表达水平，发现骨关节结核组中 TLR4 蛋白数量较健康时亮度明显高于健康体检组。骨关节结核组中 Tollip 蛋白和健康体检组相亮度也较亮。同样还发现骨关节结核组中 TLR4 蛋白为高亮度红色荧光的ollip 蛋白区域蓝色荧光亮度明显较暗，而 TLR4 蛋白为暗亮度红色荧光的ollip 蛋白区域蓝色荧光亮度明显较亮。（随机选取两组成员的免疫荧光技、2-3、2-4、2-5、2-6、2-7）

图 2-2 骨关节结核组 Tollip 蛋白 （×300）Figure 2-2 Tollip protein in the osteoarticular tuberculosis group（×300）

【参考文献】

相关期刊论文 前6条

1 杨剑;康建平;王松;雷飞;;前路固定治疗胸腰椎结核失败原因分析及处理[J];华西医学;2015年01期

2 李洁琼;谢兰品;董雅坤;綦辉;孙琳;焦伟伟;肖婧;徐放;申晨;申阿东;;TLR4基因多态性与中国汉族儿童结核病易感性的关联研究[J];山西医科大学学报;2014年12期

3 林洪升;杨海波;谢恺庆;杨利;周静文;周马林;黄企光;;TLR2和TLR4在牛型结核分枝杆菌诱导的肾小管上皮细胞损伤中的作用[J];中国病理生理杂志;2014年06期

4 李枫;袁俐;;热休克蛋白与结核病关系概述[J];中国病原生物学杂志;2013年10期

5 刘伟;金格勒;唐文;;新疆住院病人骨与关节结核的流行病学初步分析[J];新疆医学;2010年01期

6 徐发良;;Toll作用蛋白(Tollip)在急性阑尾炎时的表达[J];第二军医大学学报;2010年01期

本文编号：2742965