三氧化二砷通过内质网应激诱导细粒棘球蚴原头节凋亡

发布时间：2020-07-17 23:07

【摘要】：目的:本课题组前期实验证实了三氧化二砷(As_2O_3)可以抑制细粒棘球蚴原头节活力,破坏原头节结构,激活caspase-3活性,但其机制尚不清楚。已有研究证实,As_2O_3通过激活氧化应激和内质网应激诱导肿瘤细胞凋亡,本研究探讨As_2O_3诱导细粒棘球蚴原头节凋亡的可能机制。方法:本研究用不同浓度的As_2O_3作用于细粒棘球蚴原头节不同时间,以新鲜感染的病羊肝脏中提取的细粒棘球蚴原头节为研究对象。用0.1%的伊红溶液染色检测原头节的活力,并根据数值绘制活力曲线,荧光显微镜观察原头节内的ROS产生情况,并检测相关的抗氧化酶GSH,SOD活力,试剂盒检测原头节内的caspase-3酶的活力和表达量,流式细胞仪检测原头节内Ca~(2+)水平,western-blot检测原头节内GRP78,caspase-12,Bax,Bcl-2蛋白的表达水平。结果:伊红染色结果:原头节活力随着As_2O_3作用时间的延长和浓度的增加逐步下降;As_2O_3可增加原头节的caspase-3酶活性,增加ROS活力,同时降低SOD,GSH活性(P0.05);流式细胞仪检测结果:与对照组相比药物作用后Ca~(2+)浓度升高明显,具有时间浓度依赖性(P0.05)。western-blot检测结果:GRP78、caspase-12和Bax表达水平均明显升高,Bcl-2蛋白表达水平降低,且均呈现浓度依赖性。结论:As_2O_3诱导细粒棘球蚴原头节凋亡可通过内质网应激和氧化应激途径途径,为肝包虫病提供了一个新的药物作用靶点。
【学位授予单位】：石河子大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R532.32
【图文】：

原头节,细粒棘球蚴,活力

三氧化二砷通过内质网应激诱导细粒棘球蚴原头节凋亡结果（Results）.不同浓度 As2O3对细粒棘球蚴原头节活力的影响实验结果显示 As2O3对体外培养的细粒棘球蚴原头节生长具有抑制作用。通过伊红染色实验，培养 14d 时，空白对照组原头节活力为 95%左右，与对照组相比，各浓度组 As2O3作用后的节生存活性都有不同程度的抑制。随着作用时间延长，As2O3对原头节的抑制作用逐渐增强。 8μmol/L 作用组对原头节活性抑制效果最明显，培养 2d 时，8μmol/L 作用组原头节活性为 82养 2d 时，该浓度组原头节活力降低至 43%，其他各药物作用组对原头节活性抑制效果则相对。从图中可以看出，随着作用时间延长和浓度增加，As2O3对原头节生存的抑制作用越明显。

原头节,细粒棘球蚴

16图 2.不同浓度的 As2O3对细粒棘球蚴原头节内 ROS 的影响*: P<0.05#3对细粒棘球蚴原头节内 SOD 的影响用后细粒棘球蚴原头节内 SOD 水平的变化，我们采用酶标μmol/L 以及 8μmol/L 的 As2O3分别作用原头节时，8μmol/L 4μmol/L 组，二者与对照组相比均下降，4d 组下降的趋势）说明 As2O3作用后原头节内 SOD 水平明显下降，且在 4义（P<0.05）。

原头节,细粒棘球蚴

图 3.不同浓度的 As2O3对细粒棘球蚴原头节内 SOD 的影响*: P<0.05#3对细粒棘球蚴原头节内 GSH 的影响作用后细粒棘球蚴原头节内 SOD 水平的变化，我们采用酶标μmol/L 以及 8μmol/L 的 As2O3分别作用原头节时，8μmol/L于 4μmol/L 组，二者与对照组相比均下降，4d 组下降的趋势）说明 As2O3作用后原头节内 GSH 水平明显下降，且在 4意义（P<0.05）。

【参考文献】