人ABHD16A与IFITMs相互作用的初步探究

发布时间：2020-09-15 16:45

　　人类α/β-水解酶结构域16A(Abhydrolase domain containing 16 A,ABHD16A)又被称为人类白细胞抗原-B(Human leukocyte antigen-B,HLA-B)相关转录物5(HLA-B associated transcript 5,BAT5),是ABHD(Abhydrolase domain containing)蛋白家族成员之一,在哺乳动物中高度保守。因ABHD16A基因定位在主要组织相容性复合物(Major histocompatibility complex,MHC)Ⅲ基因簇中,推测其可能参与机体的免疫调节,但迄今为止,对其功能的研究报道较少。前人在研究MHCIII相互作用蛋白时发现ABHD16A和干扰素诱导的跨膜转运蛋白1(Interferon inducible transmembrane protein1,IFITM1)具有相互作用。IFITM1属于IFITMs家族蛋白,该家族蛋白不仅具有抗病毒活性,还在细胞增殖迁移、细胞粘附、信号转导等方面发挥着重要的作用。实验室前期研究显示,IFITM~(-/-)的小鼠出现炎症反应,且在小鼠肝脏中,ABHD16A的蛋白含量大量增加,推测ABHD16A与IFITMs的相互作用在炎症反应、抗病毒作用等功能方面具有一定的联系,并据此开展研究。主要以人源ABHD16A和IFITM1、IFITM2、IFITM3为研究对象,采用酵母双杂交系统、亚细胞共定位研究ABHD16A和IFITM的相互作用,采用基因瞬时过表达、脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激等方法探索其在炎症反应中的作用,并结合了临床乙肝病人血液样本的ABHD16A与IFITMs表达检测。结果显示:酵母双杂交实验证明了ABHD16A与IFITM1存在相互作用;激光共聚焦显微观察结果显示ABHD16A分别与IFITM1、IFITM2、IFITM3共定位于细胞膜性区域;过表达ABHD16A、IFITM1、IFITM2、IFITM3后,促炎症因子IL-6表达量下降,抗炎因子IL-10表达量上升(P0.05),促炎症因子INOS和TNFα的含量也有所上升;细胞受LPS刺激后,ABHD16A、IFITM1、IFITM2、IFITM3、TNFα的mRNA上调(P0.05);说明ABHD16A、IFITM1、IFITM2、IFITM3在炎症反应中发挥重要作用;临床乙肝患者血液样本检测结果显示,ABHD16A表达下调,“大三阳”患者的IFITM1、IFITM2、IFITM3表达量均下调,“小三阳”患者的IFITM1、IFITM2、IFITM3表达量上调,表明乙肝病毒感染引起的ABHD16A、IFITM1、IFITM2、IFITM3表达变化,值得进一步研究。本研究证明了ABHD16A和IFITMs的相互作用,并对其在炎症反应和乙型肝炎患者的表达情况进行了初步研究,为进一步研究ABHD16A和IFITMs在炎症反应、抗肝炎病毒的方面功能的研究上提供了理论基础。
【学位单位】：河南农业大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2018
【中图分类】：R512.62
【部分图文】：

氨基酸序列,基因,位置,主要组织相容性复合物

且在哺乳动物中氨基酸序列高度保守。人的 ABHD16A 又称为人类白细胞抗uman leukocyte antigen-B， HLA-B）相关转录物 5（HLA-B associated transcript 5, BAT5）含有 α/ β-水解酶结构域（Abhydrolase domain containing, ABHD）家族，是典型的代谢丝。对其蛋白结构和功能的预测结果显示该家族蛋白在脂质代谢、信号转导和代谢类疾病调多种的功能[3]。 ABHD16A 的基因定位人 ABHD16A 位于染色体 6p21.33 的位置，有 21 个外显子，4 个转录本，其中只有两个码蛋白（NCBI 参考序列号：NM_001177515.1 和 NM_021160.2）。Spies 等[4-6]研究显D16A 位于人类主要组织相容性复合物（Human major histocompatibility complex, MHC）簇中，且位于补体基因簇 C2 和 HLA-B 靠近编码肿瘤坏死因子（tumor necrosis factor，Tβ）基因的长度为 555kb 的基因区域中（图 1A）。另外，家鼠的 ABHD16A 位于第 17 号主要组织相容性复合物Ⅲ的基因簇中，且位于热休克蛋白（Heat shock protein）Hsp70 和，靠近蛋白激酶 Ck2b 基因的区域中[131-133]（图 1B）。ABHD16A 的基因在人和鼠基因组特点提示该蛋白可能与机体免疫有关。A

结构域,溶血磷脂酶,丙酰,结合酶

但在后期进化中发生了变化，它们保留了催化残基，而结合位bioH 结构域位于氨基酸 276-428 位置处，这种辅酶 A 结合酶是产生双丙酰辅构域在生物素生物合成过程中有一定的作用，但具体功能目前尚不清楚[8-9]酸 302-398 位置处，该结构域有溶血磷脂酶活性，属于 α/β 水解酶超家族[3,1图 2：预测 ABHD16A 蛋白三维模式图Fig.2 Prediction of ABHD16A Protein Three-Dimensional Patterns

三维模式,蛋白,溶血磷脂酶,辅酶

预测ABHD16A蛋白三维模式图

【参考文献】