乙肝相关性肝癌患者外周血单核细胞表面TLR2、TLR4表达与小肠细菌过度生长的关系探讨

发布时间：2020-11-14 10:01

　　 背景原发性肝癌作为临床上最常见的恶性肿瘤之一,严重威胁着人民的健康。流行病学发现,我国的肝癌患者中约90%有HBV感染病史。已有文献报道,在慢性肝病患者中可观察到肠道细菌移位,小肠细菌过度生长(Small Intestinal Bacterial Overgrowth,SIBO)及内毒素血症。Toll样受体(Toll-like receptors,TLRs)作为最重要的模式识别受体之一,在宿主抗病原微生物入侵的免疫应答中发挥重要作用。越来越多的研究显示慢性炎症持续存在与肝癌的发生密切相关,TLRs介导的免疫炎症反应在此过程中起重要作用,但具体的机制仍不清楚。目的探讨乙肝相关性肝癌患者外周血单核细胞(Peripheral blood mononuclear cell,PBMC)表面TLR2和TLR4的表达水平及与SIBO的关系。方法选取2015年8月至2017年8月期间郑州人民医院消化内科收住院的乙肝相关性肝癌患者(乙肝肝癌组)46例,慢性乙型肝炎患者(慢乙肝组)35例和健康体检者(健康对照组)16例。利用流式细胞术(Flow cytometry,FCM)检测三组研究对象外周血CD14~+单核细胞表面TLR2~+细胞、TLR4~+细胞所占的比例(%)和平均荧光强度的几何均数(geometric mean fluorescence,GMF);行乳果糖氢呼气试验(lactoluse hydrogen breath test,LHBT)检测SIBO的发生率;应用显色基质鲎试剂试管法检测内毒素水平。比较健康对照组、慢乙肝组及乙肝肝癌组三组间TLR2和TLR4的表达、内毒素水平、SIBO发生率的不同,并比较慢乙肝组和乙肝肝癌组合并SIBO阳性者与其对应的SIBO阴性者TLR2、TLR4的表达水平有无差异,最后将TLR2、TLR4在乙肝相关性肝癌者中的表达水平与内毒素进行相关性分析。结果1.乙肝肝癌组SIBO阳性率为71.7%,慢乙肝组SIBO阳性率为28.6%,健康对照组SIBO阳性率为6.3%,三组的SIBO阳性率差异具有统计学意义(?~2=26.77,P0.05);进一步进行两两比较显示,乙肝肝癌组SIBO阳性率高于慢乙肝组及健康对照组,差异具有统计学意义(?~2=14.87,Pα’=0.017;?~2=20.56,Pα’=0.017);慢乙肝组SIBO的阳性率高于健康对照组,但差异无统计学意义(Pα’=0.017)。2.乙肝相关性肝癌患者外周血CDl4~+单核细胞表面TLR2~+细胞、TLR4~+细胞所占的比例(%)和GMF分别为70.08±11.83、76.27±11.13和94.35±26.05、41.96±14.32显著高于慢乙肝组25.29±7.28、22.97±7.39和32.66±7.57、26.67±5.77及健康对照者20.83±6.08、14.89±8.21和26.96±6.47、15.21±6.87差异均具有统计学意义(P0.05)。慢乙肝患者TLR2~+细胞的比例与健康对照组者相比,差异无统计学意义(P0.05);TLR2~+细胞的GMF、TLR4~+细胞的比例及GMF与健康对照组者相比,差异具有统计学意义(P0.05)。3.将患者依乳果糖氢呼气的结果分为SIBO阳性组和SIBO阴性组;其中乙肝相关性肝癌合并SIBO阳性患者外周血CDl4~+单核细胞表面TLR2~+细胞、TLR4~+细胞的比例(%)及GMF分别为73.62±11.10、80.58±9.00及103.19±22.75、46.81±13.90与其各自对应的SIBO阴性组61.09±11.10、65.34±8.25及71.91±20.11、29.65±4.96相比差异均具有统计学意义(均P0.05)。慢乙肝合并SIBO阳性组TLR2~+细胞、TLR4~+细胞的比例(%)及GMF分别为30.85±7.49、28.15±10.32及38.24±10.48、28.15±10.32与其对应的SIBO阴性组23.90±6.65、21.67±6.03及31.26±6.13、24.86±4.76相比差异具有统计学意义(P0.05)。4.乙肝相关性肝癌患者血浆内毒素水平高于慢乙肝组和健康对照组,差异具有统计学意义(P0.05);乙肝肝癌合并SIBO阳性者内毒素水平高于SIBO阴性者,差异具有统计学意义(P0.05)。5.乙肝相关性肝癌患者外周血CDl4~+单核细胞表面TLR2~+细胞、TLR4~+细胞的比例(%)及GMF与内毒素水平呈正相关(r分别为0.371、0.656、0.469、0.805,均P0.05)。结论乙肝相关性肝癌患者易发生SIBO,而合并SIBO患者TLR2、TLR4表达水平及血浆内毒素浓度增高,且内毒素浓度与TLR2、TLR4的表达水平升高呈正相关,SIBO可能通过TLR2、TLR4的高表达在肝癌的发生发展过程中发挥一定的作用。
【学位单位】：新乡医学院
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2018
【中图分类】：R512.62;R735.7
【部分图文】：

新乡医学院硕士学位论文利用前向散射光 (Forward light scatter FSC) 和侧向散射光 (Side light sc散点图, 并去除死亡细胞及碎片，CD14 标记外周血单核细胞，CD14 与出 PBMC（见图 1.图 2）。每份样本获取 10000 个 CD14+单核细胞，记录单核细胞表面 TLR2+和 TLR4+细胞的比例（%）及 GMF,作直方图比较

新乡医学院硕士学位论文利用前向散射光 (Forward light scatter FSC) 和侧向散射光 (Side light sc散点图, 并去除死亡细胞及碎片，CD14 标记外周血单核细胞，CD14 与出 PBMC（见图 1.图 2）。每份样本获取 10000 个 CD14+单核细胞，记录单核细胞表面 TLR2+和 TLR4+细胞的比例（%）及 GMF,作直方图比较

图3：乙肝肝癌组，慢乙肝组，健康对照组外周血CD14+单核细胞表面TLR2+细胞所占比例的流式检测图图4：乙肝肝癌组，慢乙肝组，健康对照组外周血CD14+单核细胞表面TLR2+细胞GMF的流式检测图
【参考文献】

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1 ;原发性肝癌诊疗规范(2017年版)[J];传染病信息;2017年03期

2 曹宽;鲍仲明;周新宇;贾广宇;张斌;温泉;王人颢;;乙型肝炎病毒X蛋白对肝癌细胞侵袭与迁移能力的作用及机制[J];中华消化外科杂志;2017年02期

3 魏新朋;高晓;马英杰;;乙型肝炎肝硬化患者小肠细菌过度生长与疾病严重程度的相关性[J];临床肝胆病杂志;2016年04期

4 Meirav Pevsner-Fischer;Timur Tuganbaev;Mariska Meijer;Sheng-Hong Zhang;Zhi-Rong Zeng;Min-Hu Chen;Eran Elinav;;Role of the microbiome in non-gastrointestinal cancers[J];World Journal of Clinical Oncology;2016年02期

5 张原青;郭津生;;乙型肝炎病毒促进肝细胞性肝癌发生的机制[J];中华肝脏病杂志;2016年02期

6 Christina M Hester;Venkatakrishna R Jala;Morgan GI Langille;Shahid Umar;K Allen Greiner;Bodduluri Haribabu;;Fecal microbes, short chain fatty acids, and colorectal cancer across racial/ethnic groups[J];World Journal of Gastroenterology;2015年09期

7 Nur Arslan;;Obesity, fatty liver disease and intestinal microbiota[J];World Journal of Gastroenterology;2014年44期

8 Milutin Bulajic;Nikola Panic;Johannes Matthias L?hr;;Helicobacter pylori and pancreatic diseases[J];World Journal of Gastrointestinal Pathophysiology;2014年04期

9 颜见;姚志成;邓美海;;乙型肝炎病毒相关性肝癌发生的分子机制研究进展[J];中华普通外科学文献(电子版);2012年05期

10 Noemí Eiró;Francisco J Vizoso;;Inflammation and cancer[J];World Journal of Gastrointestinal Surgery;2012年03期

本文编号：2883354