实时荧光定量PCR检测斑点热立克次体方法的建立

发布时间：2021-01-12 11:29

　　目的建立斑点热群立克次体（SFGR）TaqMan实时荧光定量PCR（qPCR）快速检测方法。方法根据日本斑点热立克次体外膜蛋白A（ompA）基因序列设计特异性引物和探针,建立基于TaqMan探针的实时荧光定量PCR检测方法,对其特异性、灵敏性、重复性进行检测,用建立的此检测方法和常规的巢式PCR方法同时对临床收集的80份患者血标本进行检测并比较两者结果。结果成功建立了检测SFGR的实时荧光定量PCR方法,标准曲线的循环阈值与模板拷贝数均呈良好的线性关系（r>0.99）,且在检测SFGR核酸样本时具有良好的灵敏度、特异性和重复性。结论该研究建立了基于TaqMan探针检测SFGR的实时荧光定量PCR检测方法,为临床实验室快速确诊SFGR疾病提供了快速、有效的技术手段。 

【文章来源】：安徽医科大学学报. 2020,55(07)北大核心

【文章页数】：6 页

【部分图文】：

ompA基因TaqMan qPCR敏感性结果

建立的qPCR方法对质粒含量为1.9×103、1.9×102、1.9×101、1.9×100和1.9×10-1拷贝有阳性扩增信号,对1.9×100、1.9×10-1拷贝均未检测到扩增信号,表明本研究建立的方法的最低检测限为19拷贝。见图4。图2 ompA基因TaqMan qPCR标准曲线

ompA基因TaqMan qPCR标准曲线

【参考文献】：
期刊论文
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本文编号：2972772