糠秕马拉色菌细胞外囊泡对皮肤角质形成细胞的作用及机制研究

发布时间：2021-03-23 02:40

　　目的:马拉色菌是寄生于皮肤表面的常见真菌之一,与一些常见的炎症性皮肤病的发病有着密切的关系,如脂溢性皮炎、马拉色菌毛囊炎和特应性皮炎等。真菌细胞外囊泡已在多种真菌中被发现,其可参与细胞营养摄取、免疫调节和细胞-细胞通信等病理生理过程。研究表明合轴马拉色菌可产生细胞外囊泡,其可诱导外周血单核细胞产生IL-4和TNF-?。然而,细胞外囊泡是否存在于其他马拉色菌亚种中,及其对角质形成细胞的作用,目前均未有报道。在前期工作中我们发现培养于富含脂质条件下的糠秕马拉色菌ABC转运通道的表达上调,文献表明该通道的高表达与细胞外囊泡的合成相关。据此,本研究旨在探究糠秕马拉色菌是否可产生细胞外囊泡,其对角质形成细胞的免疫调节作用以及相关的分子机制,为马拉色菌相关皮肤疾病的发病机制和治疗提供重要的科学数据。研究方法:1、本研究首先利用蛋白组学的方法对培养于富含脂质和缺乏脂质条件下的糠秕马拉色菌菌体蛋白的表达进行鉴定,然后利用生物信息分析的方法对差异表达蛋白进行了分析,对差异表达蛋白在GO与KEGG通路中的富集情况做了进一步分析,后用PRM技术对蛋白组学结果进行验证。2、通过FUN1染色法对待提取细胞外囊泡... 

【文章来源】：中国医科大学辽宁省

【文章页数】：105 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

质谱质控检测结果

中国医科大学博士学位论文含量分别为 100%，75%，50%，25%和 0%。将数量为 1菌分别接种于各个培养基中，经过 48 h 培养后，离心取沉菌落计数的方法，我们将不同脂质浓度培养后的糠秕马拉释后涂布于标准培养平板上，72 h 后记录各个平皿中的菌养前相比，A 组（脂质充足）的菌落数较培养前有明显的）的菌落数较前无明显差异，该结果说明经过无脂质培养菌虽不增殖，但仍具有生物学活性（图 2）。

图 3. 所有样本两两之间皮尔森相关系数。皮尔森系数越接近-1，表示两者之间的负相关性越强（用绿色表示），反之皮尔森系数越接近 1，表示两者之间正相关性越强（用红色表示），皮尔森系数接近 0，表示相关性越弱（用白色表示）。本实验结果显示所有样本之间均具有较强的正相关性。注：A 代表实验组，E 代表对照组，数字代表样本代号。3.3 差异蛋白 GO 富集分析对上述鉴定到的蛋白进行注释和差异表达筛选后，为检测差异表达蛋白是否在某类功能中有显著的富集趋势，我们对上调及下调差异表达蛋白分别进行了GO 富集分析，包括生物进程、细胞组成和分子功能及其各自下属的二级功能分类。结果显示，上调的差异蛋白在“细胞组成”中主要富集于膜（membrane）系统；在“分子功能”中主要富集于丝氨酸型肽酶活性（serine-type peptidaseactivity）、丝氨酸水解酶活性（serine hydrolase activity）和水解酶活性（hydrolaseactivity）等功能中；在“生物学进程”中主要富集于脂质代谢进程（lipid metabolic

【参考文献】：
期刊论文
[1]马拉色菌蛋白酶活性测定方法的建立及其应用[J]. 曾蔚,贾文祥,冉玉平,邝玉,赵红梅,郭晓莉.  微生物学免疫学进展. 2004(01)



本文编号：3094969