淋球菌经NLRP3途径调节小鼠脾细胞Th17/Treg平衡

发布时间：2021-04-01 23:51

　　目的研究NLRP3对小鼠脾细胞淋球菌感染模型中Th17/Treg平衡的调节作用。方法体外分离、培养小鼠脾细胞后,分为如下4组:空白对照组、NLRP3拮抗剂（MCC950）组、淋球菌感染组、淋球菌+MCC950组。培养48 h后收集细胞,采用细胞内染色流式细胞术检测Th17/Treg细胞比例,利用实时荧光定量PCR检测NLRP3、Th17/Treg特异性转录因子RORγt、Foxp3 mRNA表达水平,Western blot检测NLRP3、RORγt、Foxp3蛋白表达。ELISA法检测脾细胞培养上清中Th17/Treg相关细胞因子IL-17、TGF-β、IL-10水平。结果脾细胞在淋球菌的刺激下,Th17细胞和Treg细胞比例增多,细胞内NLRP3、Th17/Treg特异性转录因子RORγt、Foxp3 mRNA和蛋白表达水平升高,细胞培养上清中IL-17、TGF-β、IL-10含量增高（P<0.01）;加入MCC950预处理后,Th17细胞比例、细胞内NLRP3、RORγt mRNA和蛋白表达、细胞培养上清中IL-17含量明显降低,Treg细胞比例、细胞内Foxp3 mRNA... 

【文章来源】：中国皮肤性病学杂志. 2020,34(10)北大核心CSCD

【文章页数】：5 页

【部分图文】：

脾细胞中Th17细胞和Treg细胞比例

Western blot结果显示,NLRP3、RORγt、Foxp3蛋白各组间差异有统计学意义(F=136.29,138.18,126.37,F0.01=4.57;P均<0.01)。淋球菌刺激小鼠脾细胞后,细胞内NLRP3、RORγt、Foxp3蛋白表达较对照组明显增加,分别为对照组的5.57倍(t=11.40,t0.01=2.98;P<0.01)、5.84倍(t=12.57,t0.01=2.98;P<0.01)和2.79(t=8.84,t0.01=2.98;P<0.01)倍。加入NLRP3拮抗剂(MCC950)预处理后,细胞内NLRP3、RORγt蛋白表达水平明显降低,细胞内Foxp3蛋白表达水平明显增高,与淋球菌感染组比较差异有统计学意义(t=12.17,9.74,13.53,t0.01=2.98,P均<0.01),见图3～4。图3 细胞内NLRP3、RORγt、Foxp3蛋白免疫印迹结果

细胞内NLRP3、RORγt、Foxp3蛋白免疫印迹结果


本文编号：3114188