慢性乙型肝炎患者肝组织HBV cccDNA定量检测及临床应用
发布时间:2021-08-08 19:38
目的:乙型肝炎病毒(Hepatitis B virus,HBV)共价闭合环状DNA(Covalently closed circular DNA,cccDNA)是乙肝病毒前基因组RNA(Pregenomic RNA,pg RNA)复制的原始模板,对乙肝病毒的复制以及感染状态的建立具有十分重要的意义。以往文献报告了多种进行HBV cccDNA定量检测的方法,各有其利弊。本研究拟采用荧光定量聚合酶链反应即荧光定量PCR(Fluorescence quantitative polymerase chain reaction,FQ-PCR)的检测方法进行HBV cccDNA定量检测,初步探讨HBV cccDNA荧光定量检测方法在慢性乙型肝炎患者肝组织中的临床应用及意义。方法:通过使用HBV cccDNA、HBV Total DNA以及HBV pg RNA的特异性引物和探针,将含有HBV基因的p HBV1.3-B6质粒作为标准品,根据HBV质粒的不同拷贝数,建立FQ-PCR检测的标准曲线,通过实时荧光定量PCR检测HBV cccDNA、BV Total DNA以及HBV pg RNA含量;用Ju...
【文章来源】:华中科技大学湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】:53 页
【学位级别】:硕士
【部分图文】:
建立病毒学指标的荧光定量PCR扩增曲线和标准曲线
图 2 终末期肝病患者肝组织病毒学指标的表达情况A 图:终末期肝病患者肝细胞 HBV cccDNA 的表达情况,B 图:终末期肝病患者肝细胞 HBVtal DNA 的表达情况,C 图:NAs 经治的终末期肝病患者肝细胞 HBV cccDNA 的表达情况,D:NAs 经治的终末期肝病患者肝细胞 HBV Total DNA 的表达情况。
图 3 为核苷经治慢性乙型肝炎患者基线和治疗 48 周时肝细胞病毒学指标A 图:肝细胞 HBV cccDNA 定量;B 图:肝细胞 HBV Total DNA 定量;C 图:肝细胞 HBV pgRNA定量;D 图:血清 HBsAg 定量
【参考文献】:
期刊论文
[1]Is it possible to stop nucleos(t)ide analogue treatment in chronic hepatitis B patients?[J]. Elia Moreno-Cubero,Robert T Sánchez del Arco,Julia Pe?a-Asensio,Eduardo Sanz de Villalobos,Joaquín Míquel,Juan Ramón Larrubia. World Journal of Gastroenterology. 2018(17)
[2]中国2005-2016年乙型病毒性肝炎报告发病的年龄和地区特征[J]. 张国民,缪宁,郑徽,孙校金,尹遵栋,王富珍. 中国疫苗和免疫. 2018(02)
[3]乙型肝炎病毒RNA病毒样颗粒的发现及其对抗病毒治疗临床实践的潜在影响[J]. 鲁凤民,王杰,陈香梅,江建宁,张文宏,赵景民,任红,侯金林,夏宁邵. 中华肝脏病杂志. 2017 (02)
[4]Effect of switching from treatment with nucleos(t)ide analogs to pegylated interferon α-2a on virological and serological responses in chronic hepatitis B patients[J]. Li-Ting He,Xiao-Guang Ye,Xiao-Yuan Zho. World Journal of Gastroenterology. 2016(46)
[5]Covalently closed-circular hepatitis B virus DNA reduction with entecavir or lamivudine[J]. Scott Bowden,Stephen Locarnini,Ting-Tsung Chang,You-Chen Chao,Kwang-Hyub Han,Robert G Gish,Robert A de Man,Miao Yu,Cyril Llamoso,Hong Tang. World Journal of Gastroenterology. 2015(15)
[6]HBVcccDNA的检测及临床意义[J]. 黄维亮,谢元林. 中国医师杂志. 2011 (05)
[7]乙肝病毒cccDNA检测方法及临床意义的研究进展[J]. 李红,唐红. 生物医学工程学杂志. 2009(03)
[8]Effects of antiviral agents and HBV genotypes on intrahepaticcovalently closed circular DNA in HBeAg-positive chronichepatitis B patients[J]. Hai-Ying Lu, Li-Wei Zhuang, Yan-Yan Yu, Chong-Wen Si, Jun Li, Zheng Zeng, Department of Infectious Diseases, Peking University First Hospital, Beijing 100034, China Jian-Jun Zhang, Beijing Zhongfuyouxin, Beijing 100085, China Xin-Yue Chen, Beijing You’an Hospital, Beijing 100054, China Zhong-Hou Han, Qinhuangdao Third Hospital, Qinhuangdao 066000, Hebei Province, China Yong Chen, Huai’an Infectious Disease Hospital, Huai’an 223300, Jiangsu Province, China. World Journal of Gastroenterology. 2008(08)
本文编号:3330558
【文章来源】:华中科技大学湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】:53 页
【学位级别】:硕士
【部分图文】:
建立病毒学指标的荧光定量PCR扩增曲线和标准曲线
图 2 终末期肝病患者肝组织病毒学指标的表达情况A 图:终末期肝病患者肝细胞 HBV cccDNA 的表达情况,B 图:终末期肝病患者肝细胞 HBVtal DNA 的表达情况,C 图:NAs 经治的终末期肝病患者肝细胞 HBV cccDNA 的表达情况,D:NAs 经治的终末期肝病患者肝细胞 HBV Total DNA 的表达情况。
图 3 为核苷经治慢性乙型肝炎患者基线和治疗 48 周时肝细胞病毒学指标A 图:肝细胞 HBV cccDNA 定量;B 图:肝细胞 HBV Total DNA 定量;C 图:肝细胞 HBV pgRNA定量;D 图:血清 HBsAg 定量
【参考文献】:
期刊论文
[1]Is it possible to stop nucleos(t)ide analogue treatment in chronic hepatitis B patients?[J]. Elia Moreno-Cubero,Robert T Sánchez del Arco,Julia Pe?a-Asensio,Eduardo Sanz de Villalobos,Joaquín Míquel,Juan Ramón Larrubia. World Journal of Gastroenterology. 2018(17)
[2]中国2005-2016年乙型病毒性肝炎报告发病的年龄和地区特征[J]. 张国民,缪宁,郑徽,孙校金,尹遵栋,王富珍. 中国疫苗和免疫. 2018(02)
[3]乙型肝炎病毒RNA病毒样颗粒的发现及其对抗病毒治疗临床实践的潜在影响[J]. 鲁凤民,王杰,陈香梅,江建宁,张文宏,赵景民,任红,侯金林,夏宁邵. 中华肝脏病杂志. 2017 (02)
[4]Effect of switching from treatment with nucleos(t)ide analogs to pegylated interferon α-2a on virological and serological responses in chronic hepatitis B patients[J]. Li-Ting He,Xiao-Guang Ye,Xiao-Yuan Zho. World Journal of Gastroenterology. 2016(46)
[5]Covalently closed-circular hepatitis B virus DNA reduction with entecavir or lamivudine[J]. Scott Bowden,Stephen Locarnini,Ting-Tsung Chang,You-Chen Chao,Kwang-Hyub Han,Robert G Gish,Robert A de Man,Miao Yu,Cyril Llamoso,Hong Tang. World Journal of Gastroenterology. 2015(15)
[6]HBVcccDNA的检测及临床意义[J]. 黄维亮,谢元林. 中国医师杂志. 2011 (05)
[7]乙肝病毒cccDNA检测方法及临床意义的研究进展[J]. 李红,唐红. 生物医学工程学杂志. 2009(03)
[8]Effects of antiviral agents and HBV genotypes on intrahepaticcovalently closed circular DNA in HBeAg-positive chronichepatitis B patients[J]. Hai-Ying Lu, Li-Wei Zhuang, Yan-Yan Yu, Chong-Wen Si, Jun Li, Zheng Zeng, Department of Infectious Diseases, Peking University First Hospital, Beijing 100034, China Jian-Jun Zhang, Beijing Zhongfuyouxin, Beijing 100085, China Xin-Yue Chen, Beijing You’an Hospital, Beijing 100054, China Zhong-Hou Han, Qinhuangdao Third Hospital, Qinhuangdao 066000, Hebei Province, China Yong Chen, Huai’an Infectious Disease Hospital, Huai’an 223300, Jiangsu Province, China. World Journal of Gastroenterology. 2008(08)
本文编号:3330558
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