HIV感染者/艾滋病患者microRNAs表达谱分析及其影响HIV感染的机制研究
发布时间:2021-09-18 10:45
HIV在复制过程中与宿主分子发生相互作用,其中一种重要的宿主分子是microRNA。microRNA是一类成熟体长度在19-22个核苷酸的非编码RNA,在人体的多种生理和病理过程中发挥重要作用。已有的研究证据显示microRNA和HIV之间存在相互影响,microRNA在HIV感染和疾病进展过程中都起了重要作用。一方面HIV感染影响细胞中microRNA的表达谱,另一方面细胞中高表达抗HIV的microRNA不利于HIV在细胞中的复制而有利于病毒潜伏状态的形成和维持。研究显示细胞和体液中microRNA表达状态与HIV感染严重程度和进展有相关性。综合上述研究证据,可以看到microRNA在HIV感染领域作为一种干预手段和生物标记物的前景。ART (antiretroviral therapy)的应用在分子层面改变了细胞内环境,影响了HIV与宿主细胞的相互作用过程。已有证据表明ART可以使体内多种组织的mRNA表达谱及线粒体DNA表达状态发生改变,这些改变与HIV感染的病理变化和疾病进展相关。目前有关ART对microRNA表达谱影响的研究较少,也较少有研究涉及HIV感染过程中micro...
【文章来源】:浙江大学浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】:119 页
【学位级别】:博士
【部分图文】:
}samR-1}1过表达载体测序结果
hsa-miR-191-5p的表达量都在空白对照细胞的10倍以上(图3.5A),在48 h检测的一个克隆的结果显示hsa-miR-191-5p的表达量接近空白对照细胞的6倍(图3.5C);在TZM-bl细胞中,转染后24h,hsa-miR-191-5p的表达量在空白对照细胞的2.5倍(图3.5B), 48 h时为空白对照细胞的5倍(图3.5D)。
3.6 hsa-miR-191-5p mimic/inhibitor 及对照与 pNL4-3-dE-GFP/pVSV-G 共转染验:hsa-miR_-191-5p mimic/inhibitor 及对照与 pNL4-3-dE-GFP 和 pVSV-G 共转染,染48 h后检测细胞上清中HIV:p24水平。2.2改变hsa-miR-191-5p水平的基础上转染pNL4-3-dE-GFP/pVSV-G的实验转染 hsa-miR-191-5p mimic/inhibitor 或者 miR-191 过表达载体 24 h—48 h 后,sa-miR-191-5p已经对标起了抑制作用,此时转染pNL4-3-dE-GFP/pVSV-G后观细胞上清中HIV p24水平可以反映出hsa-mill-191-5p是否通过作用于乾标影响 HIV的复制过程。2.2.1 先转染 hsa-mill-191-5p mimic/inhibitor 及对照,后转染L4-3-dE-GFP/pVSV-G, ELISA 检测细胞上清 HIV p24 的实验
本文编号:3399996
【文章来源】:浙江大学浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】:119 页
【学位级别】:博士
【部分图文】:
}samR-1}1过表达载体测序结果
hsa-miR-191-5p的表达量都在空白对照细胞的10倍以上(图3.5A),在48 h检测的一个克隆的结果显示hsa-miR-191-5p的表达量接近空白对照细胞的6倍(图3.5C);在TZM-bl细胞中,转染后24h,hsa-miR-191-5p的表达量在空白对照细胞的2.5倍(图3.5B), 48 h时为空白对照细胞的5倍(图3.5D)。
3.6 hsa-miR-191-5p mimic/inhibitor 及对照与 pNL4-3-dE-GFP/pVSV-G 共转染验:hsa-miR_-191-5p mimic/inhibitor 及对照与 pNL4-3-dE-GFP 和 pVSV-G 共转染,染48 h后检测细胞上清中HIV:p24水平。2.2改变hsa-miR-191-5p水平的基础上转染pNL4-3-dE-GFP/pVSV-G的实验转染 hsa-miR-191-5p mimic/inhibitor 或者 miR-191 过表达载体 24 h—48 h 后,sa-miR-191-5p已经对标起了抑制作用,此时转染pNL4-3-dE-GFP/pVSV-G后观细胞上清中HIV p24水平可以反映出hsa-mill-191-5p是否通过作用于乾标影响 HIV的复制过程。2.2.1 先转染 hsa-mill-191-5p mimic/inhibitor 及对照,后转染L4-3-dE-GFP/pVSV-G, ELISA 检测细胞上清 HIV p24 的实验
本文编号:3399996
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