miR-125b-5p在泡型包虫病患者中的验证、分子调控和靶基因预测

发布时间：2021-10-19 11:24

　　目的:1)检测hsa-miR-125b-5p在泡型包虫病患者的血清及肝脏病灶边缘带组织中的表达;2)体外慢病毒转染Huh7细胞使hsa-miR-125b-5p过表达,检测细胞增殖活力的改变;3)初步预测和分析hsa-miR-125b-5p的靶基因,为进一步寻找泡型包虫病早期诊断的分子标志物提供一定的理论基础。方法:1)利用荧光定量PCR检测22份泡型肝包虫病患者及22份健康对照血清中hsa-miR-125b-5p的相对表达量;2)利用荧光定量PCR检测16个泡型包虫病患者肝病灶的边缘带与远离病灶的肝组织中hsa-miR-125b-5p的相对表达量;3)构建慢病毒载体转染Huh7细胞,使hsa-miR-125b-5p过表达,用CCK-8试剂盒处理转染后的Huh7细胞,然后用酶标仪检测450nm波长处的OD值,统计分析得出其增殖活力是否发生变化;4)用miRDB、star Base、miRwalk和miRTarbase四个数据库资源预测hsa-miR-125b-5p可能的靶基因,并进行整合。然后利用Enrichr数据库、KEGG数据库和STRING数据库进行GO分析、通路分析和构建靶蛋白的... 

【文章来源】：青海大学青海省 211工程院校

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【学位级别】：硕士

【部分图文】：

血清中hsa-miR-125b-5p及内参U6的扩增曲线

8图2血清中hsa-miR-125b-5p及内参U6的溶解曲线Figure2Dissolutioncurveofhsa-miR-125b-5pandinternalreferenceU6inserum1.2.2血清中hsa-miR-125b-5p的相对表达量如表2所示，实验组与对照组的相对表达量分别为2.440±0.753和1.032±0.262，说明hsa-miR-125b-5p在泡型包虫病患者组血清中的表达量要高于健康对照组。柱状图见图3。表2实时荧光定量pcr数据统计表（血清）Table2StatisticstableofRT-qPCR（serum）组别性别年龄例数相对表达量P值实验组男42.09±14.54112.440±0.753P<0.0001女42.54±10.9911对照组男55.72±12.74111.032±0.262女49.27±12.7411

11图4肝组织中hsa-miR-125b-5p及内参U6的扩增曲线Figure4Amplificationcurveofhsa-miR-125b-5pandinternalreferenceU6inliver图5肝组织中hsa-miR-125b-5p及内参U6的溶解曲线Figure5Dissolutioncurveofhsa-miR-125b-5pandinternalreferenceU6inliver2.2.2肝组织中hsa-miR-125b-5p的相对表达量实验组相对表达量为1.932±0.682，对照组相对表达量为1.001±0.049，表明泡型包虫病患者肝病灶边缘带中的hsa-miR-125b-5p表达量要高于自身远离病灶的肝组织，跟血清中的表达趋势相同。具体统计见表3，柱状图见图6。表3实时荧光定量pcr数据统计表（肝）Table3StatisticstableofRT-qPCR（liver）组别年龄例数相对表达量P值实验组45.05±11.55161.932±0.682P<0.0001对照组1.001±0.049

【参考文献】：
期刊论文
[1]非酒精性脂肪性肝病防治指南（2018更新版）[J]. National Workshop on Fatty Liver and Alcoholic Liver Disease, Chinese Society of Hepatology;Chinese Medical Association Fatty Liver Expert Committee, Chinese Medical Doctor Association;.  传染病信息. 2018(05)
[2]包虫病的危害与控制策略的选择[J]. 张文宝,郭刚,李军.  中国动物保健. 2017(07)
[3]棘球蚴病防治成就及面临的挑战[J]. 温浩,吐尔干艾力·阿吉,邵英梅,林仁勇,李海涛,吐尔洪江·吐逊,吕国栋,张文宝.  中国寄生虫学与寄生虫病杂志. 2015(06)
[4]mi R-122 negatively correlates with liver fibrosis as detected by histology and FibroScan[J]. Tünde Halász,Gábor Horváth,Gabriella Pár,Klára Werling,András Kiss,Zsuzsa Schaff,Gábor Lendvai.  World Journal of Gastroenterology. 2015(25)
[5]慢病毒载体及其研究进展[J]. 孟凡荣,陈琛,万海粟,周清华.  中国肺癌杂志. 2014(12)
[6]TGF-β/Smad信号转导通路与肝纤维化研究进展[J]. 付玲珠,郑婷,张永生.  中国临床药理学与治疗学. 2014(10)
[7]Circulating microRNAs in patients with non-alcoholic fatty liver disease[J]. Serkan Dogan,Gokmen Zararsiz,Sebnem Gursoy,Kadri Guven,Omer Ozbakir,Munis Dundar,Mehmet Yucesoy.  World Journal of Hepatology. 2014(08)
[8]棘球蚴病流行病学研究进展[J]. 齐颜凤,伍卫平.  中国寄生虫学与寄生虫病杂志. 2013(02)
[9]生物信息学重大基础科学问题及关键技术——第51期“双清论坛”综述[J]. 赵屹,谷瑞升,杜生明.  中国科学基金. 2012(02)
[10]肝星状细胞主要信号转导通路与肝纤维化的关系[J]. 汪美凤,平键,成扬.  实用肝脏病杂志. 2010(06)

硕士论文
[1]帕金森病相关基因的筛选及生物信息学分析[D]. 陈光乐.南方医科大学 2015
[2]miR-19b与TGF-β1交互作用对肝星状细胞增殖影响机制研究[D]. 王丽敏.新疆大学 2014



本文编号：3444776