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无酶的电化学传感技术检测HIV相关基因的方法研究

发布时间:2021-10-29 09:49
  人类免疫缺陷病毒(HIV)是一种攻击免疫系统的逆转录病毒,导致人类免疫系统功能丧失。目前,国内外诊断HIV感染的方法包括酶联免疫(ELISA)、免疫印迹(WB)和聚合酶链式反应(PCR)。然而,这些方法有一定的不足:或操作繁琐、或灵敏度低、或假阳性高。因此,需要发展高灵敏,操作简单,反应快速的HIV诊断新方法。本研究中,基于链的取代延伸反应和十字形的DNA纳米复合物,构建了一种无酶的电化学生物传感器实现HIV相关DNA的快速高灵敏检测。在靶物质HIV相关基因存在时,引起多次链的取代延伸反应,生成大量的DNA双链产物,并且靶物质能够进入下一次循环;DNA双链产物与固定在金电极表面的捕获探针结合产生DNA双链-捕获探针复合物;然后,生物素化的十字形DNA纳米复合物与DNA双链-捕获探针复合物杂交,使亲和素化的碱性磷酸酶结合到电极上,在底物α萘基磷酸盐存在下,产生明显的电化学信号。此策略能够检测1 pM-100 nM HIV相关基因,检测限达到0.21 pM;此方法不仅没有蛋白酶的参与和繁琐的纯化步骤,而且具有高的特异性和抗干扰能力;另外,此方法能够用于实际样本的分析。基于这些优势,此方法对... 

【文章来源】:重庆医科大学重庆市

【文章页数】:40 页

【学位级别】:硕士

【文章目录】:
英汉缩略语名词对照
中文摘要
英文摘要
1 引言
2 实验部分
3 结果和讨论
4 总结
参考文献
文献综述
    1 引言
    2 等温扩增用于高度灵敏检测
    3 杂交链反应
    4 滚环扩增信号放大策略
    5 催化的发夹组装扩增策略
    6 展望
    参考文献
致谢
攻读硕士期间发表的论文



本文编号:3464451

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