多色流式细胞术检测HIV/AIDS病人中的Th细胞亚群
发布时间:2021-11-26 17:19
目的建立多色流式方法,检测艾滋病病毒(HIV)感染者/艾滋病(AIDS)病人(简称HIV/AIDS病人)中的辅助性T细胞亚群。方法用3种细胞表面抗体CD3、CD4、CD8,6种细胞内因子抗体γ干扰素(IFN-γ)、粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、白细胞介素17(IL-17)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、IL-2、L-10,建立多色流式染色方案。根据多色流式荧光搭配原则,制定最佳配色方案。用1例HIV/AIDS病人外周血标本分别进行最适检测电压调节、荧光补偿设定、减一阴性对照(FMO对照)。确定条件后,对3例HIV/AIDS病人外周血标本进行检测分析。结果根据阴性细胞确定检测电压,用补偿微球(CompBeads)单色染色与细胞单色染色确定适宜补偿,减一阴性对照确定阴性边界,建立了九色流式方法检测HIV/AIDS病人外周血中辅助性T淋巴细胞亚群的方案,在单细胞水平同时检测多个因子。结论建立的多色流式方案可检测HIV/AIDS病人外周血中的辅助性T细胞亚群,能在单细胞水平同时检测多个因子,所需样品少,操作简便、相对快速并能准确定量。
【文章来源】:中国艾滋病性病. 2017,23(05)北大核心CSCD
【文章页数】:5 页
【文章目录】:
1 材料与方法
1.1 样本来源
1.2 方法
1.2.1 抗体选择
1.2.2 外周血单个核细胞的分离
1.2.3 细胞培养和淋巴细胞表面抗原及胞质内细胞因子染色
1.3 流式细胞术检测HIV/AIDS病人外周血Th细胞亚群
2 结果
2.1 最适电压和荧光补偿的调节
2.2 实验条件的优化
2.2.1 配色方案优化
2.2.2 细胞刺激条件优化
2.2.3 染色方案的优化
2.3 HIV/AIDS病人外周血检测
3 讨论
【参考文献】:
期刊论文
[1]艾滋病流行现状与预防策略[J]. 覃万和. 世界最新医学信息文摘. 2016(74)
[2]建立九色流式检测人外周血中TCR Vβ淋巴细胞亚群活化及凋亡方案[J]. 黄巧容,温博,李雪,胡莲,万雪梅,曾升平,孟文彤. 四川大学学报(医学版). 2016(02)
[3]IL-17、IL-23在HIV/AIDS患者外周血中的表达及其临床意义[J]. 潘熠健,朱明利,潘克女,俞冠赟,吴畑钿,师金川. 中国卫生检验杂志. 2015(16)
[4]我国预防控制经性途径传播艾滋病的政策变迁及趋势分析[J]. 徐鹏,韩琳,曾刚,马福昌,刘康迈,吕繁. 中国卫生政策研究. 2013(07)
[5]流式细胞术检测人外周血产生IL-22的淋巴细胞亚群及其在结核病患者中的应用[J]. 梁华,梁友宝,贺文欣,杨军平,孙国宏,杨小军,李柏青. 检验医学. 2013(01)
[6]应用流式细胞仪的常见问题及解决对策[J]. 王辉,高颖. 现代仪器. 2012(01)
[7]流式细胞仪的原理、应用及最新进展[J]. 赵书涛,武晓东,王策,陈永勤,唐玉国. 现代生物医学进展. 2011(22)
[8]应用CompBeads建立流式多色分析补偿的方法[J]. 傅晓岚,周伟,王晴,杨空明,谢谆怡,吴玉章. 免疫学杂志. 2008(03)
[9]流式细胞术检测人和小鼠Th细胞亚群[J]. 刘莉,张军,方超平,杨佳荟,李闻捷,沈茜. 第三军医大学学报. 2004(20)
[10]用流式细胞仪检测HIV感染者和AIDS患者的T细胞亚群[J]. 邱志峰,王爱霞,陈鸿珊,盛瑞媛. 中华实验和临床病毒学杂志. 1999(01)
本文编号:3520604
【文章来源】:中国艾滋病性病. 2017,23(05)北大核心CSCD
【文章页数】:5 页
【文章目录】:
1 材料与方法
1.1 样本来源
1.2 方法
1.2.1 抗体选择
1.2.2 外周血单个核细胞的分离
1.2.3 细胞培养和淋巴细胞表面抗原及胞质内细胞因子染色
1.3 流式细胞术检测HIV/AIDS病人外周血Th细胞亚群
2 结果
2.1 最适电压和荧光补偿的调节
2.2 实验条件的优化
2.2.1 配色方案优化
2.2.2 细胞刺激条件优化
2.2.3 染色方案的优化
2.3 HIV/AIDS病人外周血检测
3 讨论
【参考文献】:
期刊论文
[1]艾滋病流行现状与预防策略[J]. 覃万和. 世界最新医学信息文摘. 2016(74)
[2]建立九色流式检测人外周血中TCR Vβ淋巴细胞亚群活化及凋亡方案[J]. 黄巧容,温博,李雪,胡莲,万雪梅,曾升平,孟文彤. 四川大学学报(医学版). 2016(02)
[3]IL-17、IL-23在HIV/AIDS患者外周血中的表达及其临床意义[J]. 潘熠健,朱明利,潘克女,俞冠赟,吴畑钿,师金川. 中国卫生检验杂志. 2015(16)
[4]我国预防控制经性途径传播艾滋病的政策变迁及趋势分析[J]. 徐鹏,韩琳,曾刚,马福昌,刘康迈,吕繁. 中国卫生政策研究. 2013(07)
[5]流式细胞术检测人外周血产生IL-22的淋巴细胞亚群及其在结核病患者中的应用[J]. 梁华,梁友宝,贺文欣,杨军平,孙国宏,杨小军,李柏青. 检验医学. 2013(01)
[6]应用流式细胞仪的常见问题及解决对策[J]. 王辉,高颖. 现代仪器. 2012(01)
[7]流式细胞仪的原理、应用及最新进展[J]. 赵书涛,武晓东,王策,陈永勤,唐玉国. 现代生物医学进展. 2011(22)
[8]应用CompBeads建立流式多色分析补偿的方法[J]. 傅晓岚,周伟,王晴,杨空明,谢谆怡,吴玉章. 免疫学杂志. 2008(03)
[9]流式细胞术检测人和小鼠Th细胞亚群[J]. 刘莉,张军,方超平,杨佳荟,李闻捷,沈茜. 第三军医大学学报. 2004(20)
[10]用流式细胞仪检测HIV感染者和AIDS患者的T细胞亚群[J]. 邱志峰,王爱霞,陈鸿珊,盛瑞媛. 中华实验和临床病毒学杂志. 1999(01)
本文编号:3520604
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