基于荧光免疫层析技术快速检测发热伴血小板减少综合征总抗体
发布时间:2022-08-06 17:00
目的建立一种简便、快速、特异的发热伴血小板减少综合征病毒(SFTSV)总抗体的荧光免疫层析检测方法。方法利用荧光染料标记的SFTSV重组NP蛋白制备检测液,用SFTSV重组NP蛋白包被NC膜制备快速检测SFTSV总抗体的试纸条。检测100例健康者阴性血清样本确定检测方法 cut-off值,评价其敏感性、特异性和精密度,并与real-time RT-PCR法和ELISA方法进行92份SFTSV疑似病例血清检测比较。结果本方法可在12 min内完成检测,其cut-off值为0.16,可检测1∶500稀释度的SFTSV阳性血清,与汉坦病毒、HBV、HCV和类风湿因子RF无交叉反应,CV <10%。采用本方法、real-time RT-PCR法和ELISA-IgM法检测92例SFTSV疑似患者血清,其阳性率分别为57.61%、53.26%和29.35%,与ELISA法差异有统计学意义(P <0.01);以real-time RT-PCR法为标准,荧光免疫层析方法检测阴性符合率、阳性符合率分别为79.10%和89.79%,总符合率为84.78%,与ELISA法相比,其阳性符合率和总符...
【文章页数】:5 页
【文章目录】:
1 材料与方法
1.1 标本
1.2 仪器与试剂
1.3 方法
1.3.1 SFTSV总抗体检测分析液制备
1.3.2 SFTSV总抗体检测免疫层析试纸制备组装
1.3.3 荧光免疫层析法检测SFTSV血清样本
1.3.4 cut-off值确定
1.3.5 灵敏度实验
1.3.6 特异性实验
1.3.7 精密度实验
1.3.8 ELISA法检测疑似患者的SFTSV Ig M抗体
1.3.9 real-time RT-PCR法检测SFTSV核酸
1.4 统计学处理
2 结果
2.1 cut-off值确定
2.2 荧光免疫层析法和ELISA法检测灵敏度比较
2.3 特异性试验
2.4 精密度实验
2.5 3种检测方法对92份SFTSV疑似患者血清的检测结果比较
3 讨论
【参考文献】:
期刊论文
[1]实时RT-PCR与ELISA在发热伴血小板减少综合征检测中的应用[J]. 王丽,刘靓雯,冯兆雷,耿大影,苑广盈. 中华实验和临床病毒学杂志. 2015 (04)
[2]新布尼亚病毒核酸检测实时荧光RT-PCR方法的评价[J]. 吕惠荣,杨云惠,杜燕华,黄学勇. 中国卫生检验杂志. 2013(05)
[3]TaqMan探针实时荧光定量反转录-聚合酶链反应检测新布尼亚病毒L基因方法的建立与应用[J]. 虞吉寅,王忠发,任宜,毛彬. 疾病监测. 2013(02)
[4]实时荧光PCR法与ELISA法在发热伴血小板减少综合征病例检测中的比较[J]. 杜燕华,黄学勇,王海峰,尤爱国,康锴,陈豪敏,许汴利. 中国人兽共患病学报. 2013(01)
[5]一种新布尼亚病毒快速检测方法的建立及应用[J]. 宋玉亮,叶继斌,熊晨晖,刘庆辉,林万宝,龙波,崔友福,叶锋,王贵强. 中华检验医学杂志. 2012 (02)
[6]新布尼亚病毒IgG抗体间接免疫荧光检测方法的建立[J]. 黄学勇,杜燕华,李幸乐,马宏,满瑞琴,康锴,唐晓燕,陈豪敏,刘国华,许汴利. 中华预防医学杂志. 2012 (02)
[7]多功能灵敏固相时间分辨荧光免疫分析仪设计[J]. 宋克非,张佩杰. 仪器仪表学报. 2011(11)
[8]发热伴血小板减少综合征布尼亚病毒概述[J]. 李德新. 中华实验和临床病毒学杂志. 2011 (02)
[9]基于免疫层析技术的时间分辨荧光免疫分析仪研究[J]. 任冰强,黄立华,黄惠杰. 仪器仪表学报. 2009(06)
本文编号:3670023
【文章页数】:5 页
【文章目录】:
1 材料与方法
1.1 标本
1.2 仪器与试剂
1.3 方法
1.3.1 SFTSV总抗体检测分析液制备
1.3.2 SFTSV总抗体检测免疫层析试纸制备组装
1.3.3 荧光免疫层析法检测SFTSV血清样本
1.3.4 cut-off值确定
1.3.5 灵敏度实验
1.3.6 特异性实验
1.3.7 精密度实验
1.3.8 ELISA法检测疑似患者的SFTSV Ig M抗体
1.3.9 real-time RT-PCR法检测SFTSV核酸
1.4 统计学处理
2 结果
2.1 cut-off值确定
2.2 荧光免疫层析法和ELISA法检测灵敏度比较
2.3 特异性试验
2.4 精密度实验
2.5 3种检测方法对92份SFTSV疑似患者血清的检测结果比较
3 讨论
【参考文献】:
期刊论文
[1]实时RT-PCR与ELISA在发热伴血小板减少综合征检测中的应用[J]. 王丽,刘靓雯,冯兆雷,耿大影,苑广盈. 中华实验和临床病毒学杂志. 2015 (04)
[2]新布尼亚病毒核酸检测实时荧光RT-PCR方法的评价[J]. 吕惠荣,杨云惠,杜燕华,黄学勇. 中国卫生检验杂志. 2013(05)
[3]TaqMan探针实时荧光定量反转录-聚合酶链反应检测新布尼亚病毒L基因方法的建立与应用[J]. 虞吉寅,王忠发,任宜,毛彬. 疾病监测. 2013(02)
[4]实时荧光PCR法与ELISA法在发热伴血小板减少综合征病例检测中的比较[J]. 杜燕华,黄学勇,王海峰,尤爱国,康锴,陈豪敏,许汴利. 中国人兽共患病学报. 2013(01)
[5]一种新布尼亚病毒快速检测方法的建立及应用[J]. 宋玉亮,叶继斌,熊晨晖,刘庆辉,林万宝,龙波,崔友福,叶锋,王贵强. 中华检验医学杂志. 2012 (02)
[6]新布尼亚病毒IgG抗体间接免疫荧光检测方法的建立[J]. 黄学勇,杜燕华,李幸乐,马宏,满瑞琴,康锴,唐晓燕,陈豪敏,刘国华,许汴利. 中华预防医学杂志. 2012 (02)
[7]多功能灵敏固相时间分辨荧光免疫分析仪设计[J]. 宋克非,张佩杰. 仪器仪表学报. 2011(11)
[8]发热伴血小板减少综合征布尼亚病毒概述[J]. 李德新. 中华实验和临床病毒学杂志. 2011 (02)
[9]基于免疫层析技术的时间分辨荧光免疫分析仪研究[J]. 任冰强,黄立华,黄惠杰. 仪器仪表学报. 2009(06)
本文编号:3670023
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