嗅素蛋白4对卡介苗诱导巨噬细胞凋亡和细菌胞内生存率的影响

发布时间：2022-12-08 20:55

　　目的探讨嗅素蛋白4（OLFM4）对卡介苗（BCG）感染的巨噬细胞RAW264.7凋亡及BCG存活率的影响及机制。方法采用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测OLFM4 mRNA表达水平。采用免疫印迹法检测OLFM4及凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax的表达。采用平板菌落计数法分析BCG存活率,通过酶联免疫吸附试验评估巨噬细胞凋亡率。结果 BCG感染的巨噬细胞RAW264.7中OLFM4 mRNA和蛋白表达水平均显著升高,并呈时间依赖性。此外,敲除OLFM4能够抑制BCG诱导的细胞凋亡,同时增加抑凋亡蛋白Bcl-2表达,降低促凋亡蛋白Bax的表达。OLFM4沉默使RAW264.7细胞中BCG生存率明显升高。机制研究结果显示,下调OLFM4可抑制p-p65和TLR2的表达,进而阻断TLR2/NF-κB信号通路。结论沉默OLFM4可能通过阻断TLR2/NF-κB信号通路抑制BCG诱导的巨噬细胞RAW264.7凋亡,从而增加BCG存活率,初步阐明了OLFM4在巨噬细胞抗BCG感染中的作用机制,为结核病（TB）的诊断和治疗奠定了理论基础。 

【文章页数】：5 页

【文章目录】：
1 材料和方法
    1.1 主要试剂
    1.2 方法
        1.2.1 RAW264.7细胞培养
        1.2.2 BCG感染小鼠巨噬细胞RAW264.7
        1.2.3 细胞转染
        1.2.4 RT-PCR检测mRNA表达水平
        1.2.5 免疫印迹法检测蛋白表达
        1.2.6 酶联免疫吸附试验检测细胞凋亡
        1.2.7 BCG生存力检测
    1.3 统计学方法
2 结果
    2.1 OLFM4在BCG诱导的巨噬细胞RAW264.7中的表达
    2.2 OLFM4对BCG诱导的巨噬细胞凋亡的影响
    2.3 OLFM4对巨噬细胞RAW264.7中BCG存活率的影响
    2.4 沉默OLFM4阻断BCG介导的TLR2/NF-κB信号通路
3 讨论



本文编号：3714122