先天性弓形虫病孕鼠血清差异蛋白的分析

发布时间：2023-02-19 16:25

　　目的分析弓形虫感染孕鼠血清蛋白的变化,寻找诊断先天性弓形虫病的蛋白分子。方法 16只BALB/c孕鼠随机分成两组。实验组于孕8d灌胃接种弓形虫RH株速殖子5×10⁴个/0.4ml只,致胎鼠患病。在孕18d取孕鼠血清,对照组和实验组采用ELISA方法检测鼠血清弓形虫循环抗原,通过双向电泳技术分离差异蛋白点,并对差异蛋白进行生物信息学分析;运用Uniprot数据库鉴定蛋白质种类,筛选适合诊断先天性弓形虫病的特异性蛋白。结果实验组与对照组比较存在86个差异蛋白点,其中34个蛋白表达量升高,52个蛋白表达量下降。选择4个差异性显著的蛋白(升高和降低各2个)进行分析,表达量降低的为结珠蛋白HPT_MOUSE和纤溶酶原PLMN_MOUSE,表达升高的为血液结合素HEMO_MOUSE和未知蛋白Q3UKU5_MOUSE。结论成功筛选了先天性弓形虫病孕鼠血清中差异表达的蛋白质,这些蛋白质表达的改变可能与疾病的发生和发展有关。

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【文章目录】：
材料与方法
    1 材料
        1.1 虫株和实验动物
        1.2 主要仪器及试剂
    2 方法
        2.1 动物接种
        2.2 胎鼠计数
        2.3 弓形虫特异性B1基因检测
        2.4 血清蛋白提取
        2.5 蛋白质双向凝胶电泳分析
        2.6 图像采集分析
        2.7 统计学分析
        2.8 2D考染斑点质谱鉴定（MALDI-TOF-TOF)
结果
    1孕鼠血清中弓形虫循环抗原含量
    2弓形虫感染组与健康对照组比较对胎鼠数量影响
    3 弓形虫特异性B1基因的鉴定结果
    4 2-DE图谱分析
    5 差异蛋白质谱检测结果及数据库检索结果分析
讨论



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