JAK/STAT在Tapasin修饰的HBcAg表位肽融合蛋白介导乙肝免疫激活中的作用

发布时间：2023-03-02 20:57

　　目的:通过抑制小鼠体内JAK/STAT信号通路,进一步探讨JAK/STAT信号通路在CTP-HBcAg_18-27-Tapasin诱导特异性细胞毒T淋巴细胞(CTL)反应的作用。方法:1.HLA-A2小鼠分为6组,分别为:CTP-HBcAg_18-27-Tapasin(50μg)、CTP-HBcAg_18-27(50μg)、HBcAg_18-27-Tapasin(50μg)、CTP-HBcAg_18-27-Tapasin+AG490(50μg)、AG490、空白组(PBS)。HBV转基因小鼠随机分为7组,分别为:CTP-HBcAg_18-27-Tapasin(50μg)、CTP-HBcAg_18-27(50μg)、HBcAg_18-27-Tapasin(50μg)、CTP-HBcAg_18-27-Tapasin+AG490(50μg)、AG490、IFN-α(2000 IU)、PBS。融合蛋白经肌肉免疫小鼠,...

【文章页数】：61 页

【学位级别】：硕士

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中文摘要
ABSTRACT
缩略词表
前言
第一章 JAK/STAT信号通路在CTP-HBcAg18-27-Tapasin融合蛋白诱导特异性CTL反应的作用
    1.1 引言
    1.2 材料和方法
        1.2.1 主要仪器与试剂
        1.2.2 实验动物的处理
        1.2.3 制备HLA-A2 小鼠和HBV转基因小鼠脾淋巴细胞
        1.2.4 分离HLA-A2 小鼠和HBV转基因小鼠T淋巴细胞
        1.2.5 检测HLA-A2 小鼠和HBV转基因小鼠T细胞培养上清液中细胞因子
        1.2.6 检测HLA-A2 小鼠和HBV转基因小鼠T细胞内细胞因子
        1.2.7 检测HLA-A2 小鼠和HBV转基因小鼠T淋巴细胞增殖活性
        1.2.8 酶联免疫斑点(ELISPOT)法检测HLA-A2 小鼠和HBV转基因小鼠分泌IFN-γ的 T淋巴细胞
        1.2.9 统计学处理
    1.3 结果
        1.3.1 抑制JAK/STAT信号通路小鼠T淋巴细胞培养上清液中细胞因子水平变化
        1.3.2 抑制JAK/STAT信号通路流式细胞仪检测小鼠T淋巴细胞胞内细胞因子变化
        1.3.3 抑制JAK/STAT信号通路分泌IFN-γ的小鼠T淋巴细胞数量变化
        1.3.4 抑制JAK/STAT信号通路小鼠T淋巴细胞增殖活性变化
    1.4 讨论
    1.5 小结
第二章 JAK/STAT信号通路在CTP-HBcAg18-27-Tapasin融合蛋白抑制HBV转基因小鼠病毒复制的作用
    2.1 引言
    2.2 材料和方法
        2.2.1 主要仪器与试剂
        2.2.2 引物设计
        2.2.3 实验动物的处理
        2.2.4 HBV转基因小鼠框静脉取血
        2.2.5 HBV转基因小鼠血清AST、ALT、HBsAg及 HBVDNA水平检测
        2.2.6 HBV转基因小鼠脾淋巴细胞的制备
        2.2.7 HBV转基因小鼠T淋巴细胞的分离
        2.2.8 HBV转基因小鼠肝组织常规HE染色
        2.2.9 HBV转基因小鼠肝脏组织HBsAg和HBcAg免疫组织化学染色
        2.2.10 HBV转基因小鼠T淋巴细胞JAK/STAT通路分子Western blotting检测
        2.2.11 HBV转基因小鼠T淋巴细胞JAK/STAT通路分子Realtime-PCR分析
        2.2.12 统计学处理
    2.3 结果
        2.3.1 抑制JAK/STAT信号通路HBV转基因小鼠血清HBs Ag、HBV DNA、ALT及 AST水平变化
        2.3.2 抑制JAK/STAT信号通路HBV转基因小鼠肝脏病理改变
        2.3.3 抑制JAK/STAT信号通路HBV转基因小鼠肝脏组织中HBsAg和HBcAg表达
        2.3.4 抑制JAK/STAT信号通路HBV转基因小鼠T淋巴细胞JAK/STAT信号通路分子表达
    2.4 讨论
    2.5 小结
结论
参考文献
致谢
在校期间撰写文章



本文编号：3752611