细粒棘球绦虫H3蛋白的克隆表达及囊型包虫病检测效果评价
本文关键词：细粒棘球绦虫H3蛋白的克隆表达及囊型包虫病检测效果评价
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【摘要】：目的克隆、表达细粒棘球绦虫基底膜特异性硫酸乙酰肝素聚糖核心蛋白(H3),并评价其检测囊型包虫病的效果。方法将从细粒棘球绦虫原头节cDNA文库中免疫筛选的H3基因,克隆入pGEX-4T表达载体,将重组质粒转化大肠杆菌BL21细胞,用异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)进行诱导表达,用亲和层析法纯化重组蛋白,用ELISA方法检测囊型包虫病患者血清、其他寄生虫病患者血清及健康人血清,评价其检测效能,并与本课题组制备的细粒棘球蚴包囊液粗抗原(Hydatid cyst fluid,HCF)和重组Ag B8/2进行比较。结果成功构建细粒棘球蚴pGEX-4T-H3重组质粒,并在原核细胞中成功表达。重组H3抗原、纯化HCF和rAgB8/2检测囊型包虫病患者血清的敏感度分别为84.0%(68/81)、90.1%(73/81)、77.8%(63/81),3者差异无统计学意义(χ~2=4.58,P0.05)。重组H3抗原与泡型包虫病患者、囊虫病患者及血吸虫病患者血清分别存在63.3%(19/30)、16.7%(5/30)和5.0%(1/20)的交叉反应,与50份健康者血清无交叉反应;H3检测总特异度为80.8%(105/130),H3、纯化HCF[71.5%(93/130)]和rAgB8/2[82.3%(107/130)]特异度间差异无统计学意义(χ~2=5.71,P0.05)。结论重组H3抗原在囊型包虫病诊断上具有潜在的应用价值。
【作者单位】： 中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所 卫生部寄生虫病原与媒介生物学重点实验室 科技部国家级热带病国际联合研究中心 世界卫生组织热带病合作中心;
【关键词】： 细粒棘球绦虫 基底膜特异性硫酸乙酰肝素聚糖核心蛋白(H) 基因克隆 表达 诊断抗原 酶联免疫吸附试验 敏感度 特异度 交叉反应
【基金】：国家重大科技专项(2012ZX10004-220) 上海市卫计委科研项目(20134235)
【分类号】：R532.32
【正文快照】： 细粒棘球蚴病(囊型包虫病)是由细粒棘球蚴引起的一种人兽共患病,广泛流行于我国西部,严重危害人民健康并可造成重大经济损失,阻碍经济发展。当前诊断囊型包虫病所依赖的影像学方法因不能进行早期诊断[1],而影响了药物治疗效果;免疫学检测的敏感性和特异性均较高,可用于早期诊
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