VOCs指纹图快速质谱鉴定结核分枝杆菌复合群的研究

发布时间：2017-08-14 21:42

  本文关键词：VOCs指纹图快速质谱鉴定结核分枝杆菌复合群的研究

  更多相关文章： 质谱 结核分枝杆菌复合群 结核病 VOCs 挥发性代谢产物

【摘要】：目的:探讨质谱技术对结核分枝杆菌复合群相关标记物检测和鉴定,判断VOCs标记物及VOCs指纹图对结核病的诊断和鉴别诊断价值。方法:采用表面解吸常压化学电离质谱(SDAPCI-MS)技术对结核分枝杆菌复合群(Mycobacterium tuberculosis complex,MTC)及其相似菌属如非结核分枝杆菌(Nontuberculosis mycobacteria,NTM)、诺卡氏菌、马红球菌、链霉菌及龋齿罗氏菌的培养基上层行VOCs检测,同时对临床常见细菌和真菌检测,以确定MTC特异性标记物及释放时间规律。通过碰撞诱导解离(CID)技术鉴定特异谱峰的分子量和分子结构式,并用Matlab对其行主成分分析(PCA)以评估不同种属细菌VOCs之间的关系。结果:质谱检测所得VOCs指纹图可准确鉴别MTC与多种在生物学特性和临床感染上的相似菌属,主成分分析可将所有菌明显的相互区分。烟酸甲酯(m/z138)特异性存在于MTC培养基上层,在培养第9天,肉眼可见菌落之前即可检出。m/z 140和m/z 152在MTC培养基上层中含量显著高于其他菌属(P0.01,Fisher’s精确检验),是MTC相关标记物。本实验中所有菌共同产生的VOCs主要有2-苯乙醇(m/z 122),甲酸乙酯(m/z 74),丙酸(m/z 76),苯甲酸(m/z 108),普遍存在于其他细菌培养基上层,是细菌在代谢过程中有机酸或醇类的积聚。结论:SDAPCI-MS通过检测微生物的挥发性代谢产物,快速、高效的作出MTC的判断,确定了MTC的特异性标记物烟酸甲酯。VOCs指纹图可用于相似细菌“气味”的鉴别。
【关键词】：质谱 结核分枝杆菌复合群 结核病 VOCs 挥发性代谢产物
【学位授予单位】：南昌大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R446.5;R52
【目录】：

• 摘要3-4
• ABSTRACT4-7
• 英文缩略词表7-9
• 第1章 引言9-11
• 第2章 材料与方法11-17
• 2.1 材料11-12
• 2.1.1 菌株来源11
• 2.1.2 主要仪器和试剂11-12
• 2.2 方法12-17
• 2.2.1 培养基的配置12-13
• 2.2.2 标准菌株的复苏13
• 2.2.3 菌株鉴定和保存13
• 2.2.4 样品的准备13-14
• 2.2.5 质谱检测14-16
• 2.2.6 数据处理16-17
• 第3章 结果17-26
• 3.1 质谱检测结果17-23
• 3.1.1 MTC培养基上层VOCs检测17-19
• 3.1.2 MTC标记物的鉴定19-23
• 3.2 MTC与NTM，诺卡氏菌属，马红球菌和链霉菌，罗氏菌的对比23-26
• 3.2.1 指纹图对比23
• 3.2.2 主成分分析对比23-26
• 第4章 讨论26-30
• 第5章 结论30-31
• 致谢31-32
• 参考文献32-35
• 攻读学位期间的研究成果35-36
• 综述 基于mVOCs为标记物快速病原菌鉴定的研究进展36-50
• 参考文献46-50

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