利用TALEN技术建立恒河猴TRIM5α基因突变细胞株

发布时间：2017-09-05 17:15

  本文关键词：利用TALEN技术建立恒河猴TRIM5α基因突变细胞株

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【摘要】：利用TALEN技术建立恒河猴TRIM5α基因突变细胞株,为进一步研究TRIM5α基因的功能奠定基础。构建针对TRIM5α打靶基因的TALEN,通过点突变的方法获得包含TRIM5α第7个外显子中打靶位点1 211-1 224的基因序列并构建点突变donor载体。将打靶TRIM5α基因的TALEN质粒和donor质粒电转入恒河猴肾细胞(LLC-MK2)中,无限稀释法获得单克隆细胞系,通过抽提基因组DNA,再利用PCR技术扩增目标序列并测序筛选出TRIM5α碱基缺失(1 215-1 216)和点突变(1 213-1 215,1 217)的细胞系。通过共转TALEN质粒和点突变的donor质粒筛选获得了TRIM5α基因敲除和TRIM5α基因点突变的LLC-MK2细胞系。
【作者单位】： 北京工业大学生命科学与生物工程学院;湖北医药学院附属太和医院生命科学研究所;中国预防医学科学院病毒所;
【关键词】： TRIMα TALEN 恒河猴 点突变
【基金】：国家科技部重大专项(2013ZX10001004-002-005)
【分类号】：Q78;R512.91
【正文快照】： 艾滋病,即获得性免疫缺陷综合征(acquiredimmunodeficiency syndrome,AIDS),由人免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)引起,并以全身免疫系统损害严重为特征的传染性疾病。目前全世界每天约有1.5万HIV新发感染者,艾滋病已成为21世纪人类面临的最严峻的考验之一。艾，

本文编号：799239