乙型肝炎病毒对单核细胞来源的树突状细胞表型及自噬作用的影响研究
本文关键词:乙型肝炎病毒对单核细胞来源的树突状细胞表型及自噬作用的影响研究
【摘要】:目的:探寻乙型肝炎病毒(hepatitis B virus, HBV)感染对单核细胞来源的树突状细胞(dendritic cell, DC)自噬作用的影响,以及自噬的变化与树突状细胞表型变化的关系。方法:用免疫磁珠方法分选健康志愿者、慢性乙型肝炎病毒感染者外周血CD14+单核细胞,经诱导培养成为未成熟树突状细胞(immaturate dendritic cell, imDC)后,分别用单纯1640培养液(control组)、脂多糖(lipopolysaccharide, LPS) (LPS组)HepG2.2.15上清(HBV组)、HepG2上清(HepG2组)刺激imDC促使其成熟。用流式细胞检测术检测刺激后DC表型的变化,western blot、免疫荧光术检测自噬相关蛋白(LC3、Atg-5)变化情况。结果:培养10天后DC直径明显大于其前体单核细胞;其胞内的颗粒明显多于刚分选出来的单核细胞。正常人和HBV慢性感染者来源DC有相似的形态学发展过程。健康人来源的DC经HBV刺激后,与对照组相比较,表达HLA-DR及CD80、CD83、CD86增高,其中CD83的表达较LPS刺激后降低;慢性HBV感染者DC与对照组相比,高表达HLA-DR及CD80、CD86共刺激分子,低表达CD83分子(P0.05)。免疫荧光共聚焦和、vestern blot检测显示,健康人来源和慢性HBV感染者来源的DC与未刺激组相比,在HBV刺激后自噬相关蛋白LC3、Atg-5表达均增高(P0.05),与HBV刺激后HLA-DR、CD80、CD86表达水平增高变化相符。结论:持续的HBV感染对单核细胞发育的DC的形态和颗粒无明显影响。HBV感染DC后,细胞自噬作用增强,且能够使HLA-DR、CD80、CD86表达水平增高,CD83水平表达降低。
【关键词】:乙型病毒性肝炎 树突状细胞 自噬作用
【学位授予单位】:重庆医科大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2015
【分类号】:R512.62
【目录】:
- 符号说明5-7
- 中文摘要7-9
- ABSTRACT9-11
- 前言11-13
- 1 材料13-17
- 2 实验方法17-24
- 3 结果24-39
- 4 讨论39-46
- 参考文献46-50
- 全文总结50-52
- 文献综述52-61
- 参考文献57-61
- 致谢61-62
- 攻读硕士学位期间发表的论文62
- 参加的学术会议62
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