应用母体外周血中游离DNA鉴定细毛羊胎儿性别研究

发布时间：2017-10-13 07:15

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【摘要】：本研究针对不同妊娠时期细毛羊进行胎儿性别鉴定工作。首先对外周血浆/血清分别采用加热法和酚-氯仿法提取游离DNA。通过普通PCR扩增雄性性别决定基因(sex determining region Y,SRY)和β-actin检测基因的目的片段。鉴于部分样品未扩增出SRY基因目的片段,设计2对内外引物,运用优化后的巢式PCR体系再次针对SRY目的基因展开特异性扩增。最后对每个妊娠时间段的鉴定结果和实际生产结果进行统计,计算准确率。结果表明:加热法和酚-氯仿法均成功分离提取出妊娠母羊外周血浆/血清中的游离DNA,并扩增出β-actin检测基因片段;SRY阳性样本扩增出了SRY目的基因片段和β-actin检测基因片段,SRY阴性样本只扩增出了β-actin检测基因片段;性别鉴定的平均准确率达到81.25%(19.5/24),SRY基因检出率与妊娠时间的长短呈正比。结论,本研究建立了一种基于外周血游离DNA检测细毛羊胎儿性别的非创伤性且高效低廉的产前诊断技术,但性别鉴定的准确率还有待提高。
【作者单位】： 新疆农业大学动物科学学院;新疆绒毛用羊遗传育种与繁殖实验室;新疆畜牧科学院;
【关键词】： 细毛羊 外周血游离DNA SRY 性别鉴定
【基金】：国家自然科学基金(31360543、31460593) 农业部体系项目(CARS-40) 新疆农业大学产学研联合培养研究生示范基地项目(xjaucxy-yjs-20152012)
【分类号】：S826
【正文快照】： 绵羊早期妊娠诊断和胎儿性别鉴定是监测移植效果的重要指标,也是做好妊娠管理的重要措施[1]。传统的创伤性产前诊断方法(羊膜穿刺、绒毛膜取样)不仅对妊娠母体和胎儿造成伤害,而且增加了胎儿流产的概率,因此建立一种非创伤性的产前诊断方法非常必要。妊娠母体的外周血中含有属

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本文编号：1023504