梅花鹿α干扰素基因在MDBK细胞中表达及抗BVDV活性检测

发布时间：2017-11-09 16:04

  本文关键词：梅花鹿α干扰素基因在MDBK细胞中表达及抗BVDV活性检测

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【摘要】：采用基因工程技术克隆出梅花鹿α干扰素(IFN-α)成熟肽基因序列,并将其定向插入到真核表达载体pcDNA3.0(+),经酶切、PCR及测序鉴定,成功构建了pcDNA3.0-IFN-α真核重组表达质粒。将鉴定正确的阳性重组质粒经非脂质体法转染至MDBK细胞,间接免疫荧光试验检测其具有较高转染效率;Western blot法检测IFN-α蛋白在MDBK细胞中得到有效表达;病变抑制试验检测转染后的MDBK细胞具有明显抗BVDV活性;抗BVDV活性的定量试验表明转染pcDNA3.0-IFN-α质粒的MDBK细胞与感染未转染的MDBK细胞相比抗BVDV活力提高了66192倍。本试验在MDBK细胞中成功表达了梅花鹿IFN-α,并检测出其具有明显抗BVDV作用,这为梅花鹿IFN-α活性机理研究以及开发更高效的抗梅花鹿病毒性疾病干扰素制剂提供物质和理论基础。
【作者单位】： 吉林农业大学动物科学技术学院;吉林农业大学校医院;吉林农业大学中药材学院;
【基金】：吉林省自然科学基金资助项目(201115194)
【分类号】：S858.25
【正文快照】： *Corresponding author,E-mail:sufy110@163.com口蹄疫、病毒性腹泻-黏膜病等病毒性疾病正严重危害梅花鹿养殖业,目前尚未有治疗梅花鹿病毒性疾病的特效药物[1-3]。虽然抗病毒化学药物能够增强宿主抗病毒能力,但长期使用会造成畜禽产品的药物残留,产生具有耐药性的变异毒株,最

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本文编号：1162558