NCG促进性发育的动物模型建立及机理研究
本文关键词:NCG促进性发育的动物模型建立及机理研究
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【摘要】:在规模化养猪场中频频发生后备母猪初情期启动迟缓、不发情,甚至是屡屡配种失败的现象。本实验就NCG对动物性发育的影响及其机理进行了初步探究,设计了两个实验。实验一:评估NCG在促进动物性发育过程中的作用。选取SPF级SD雌性断奶大鼠60只,随机分为对照组、0.05%NCG组和0.1%NCG组;实验组(0.05%NCG和0.1%NCG)在30日龄开始饲喂添加NCG的日粮,对照组饲喂基础日粮;65日龄时(初情期前)雌雄SD大鼠合笼,观察阴栓形成情况,确定初情期并配种;记录产仔及21日龄断奶仔数并跟踪至第二胎产仔。与对照组相比,日粮中添加NCG可使SD雌性大鼠初情期提前3.5d~4.2d(P0.05);初情期时配种第一胎产仔数、产活仔数均无显著差异(P0.05);添加NCG可增加断奶成活数2.0只~2.8只(P0.05)。实验组和对照组第二胎产仔数、产活仔数、初生均重均无显著差异(P0.05)。由此可见,日粮中添加NCG可使SD雌性大鼠初情期提前并能增加断奶成活数,NCG可促进SD雌性大鼠性发育,从而获得真性性早熟。实验二:基于NCG在促进动物性发育过程中的作用,采用体外GnRH细胞模型——GT1-7神经元细胞,研究不同雌激素(E_2)添加水平和添加时间对GT1-7细胞GnRH合成和分泌的影响,以及对初情期启动相关基因(ERα、KISS-1、GPR54、GnRH等)表达的影响。体外培养GT1-7细胞,对照组不做任何处理只添加溶剂(无水乙醇),实验组添加不同浓度E_2并处理不同时间,收集培养上清液和细胞,利用酶联免疫法(ELISA)测定上清液中GnRH浓度并利用相对荧光定量法测定目的基因的表达。不同时间(6-30h),不同浓度(10-11-10-5M)E_2处理GT1-7细胞,可不同程度的刺激和抑制GnRH的分泌和GnRH、ERα、KISS-1、GPR54 mRNA表达,其中以12h 100pM E_2对GT1-7细胞GnRH分泌和GnRH、KISS-1 mRNA等的表达具有明显的促进作用;24h1μM E_2对GT1-7细胞GnRH分泌和GnRH、KISS-1 mRNA等表达具有明显的抑制作用。在此基础上,初步建立了E_2调控GnRH分泌的体外细胞模型,即100pM E_2处理12h促进GnRH分泌的模型和1μM E_2处理24h抑制GnRH分泌的模型,为进一步研究动物性发育和初情期启动提供应理论依据。
【学位授予单位】:甘肃农业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2016
【分类号】:S814
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1 王军;孙蕾;常U,
本文编号:1231562
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