3型鸭甲型肝炎病毒逆转录环介导等温扩增技术快速检测方法的建立

发布时间：2017-12-09 13:26

  本文关键词：3型鸭甲型肝炎病毒逆转录环介导等温扩增技术快速检测方法的建立

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【摘要】：为建立一种3型鸭甲型肝炎病毒(DHAV-3)的快速检测方法,本研究针对DHAV-3 VP1基因序列中的8个不同区段设计了3对特异性引物,并对反应体系进行优化,通过加入羟基萘酚蓝(HNB)实现对反应结果的可视化观察,建立了检测DHAV-3的逆转录环介导等温核酸扩增(RT-LAMP)方法,采用已建立的方法对人工感染雏鸭的血清样品和病死鸭肝组织样品提取的核酸进行了检测。结果显示,该方法仅对DHAV-3的RNA进行扩增,而对1型鸭甲型肝炎病毒(DHAV-1)以及鸭常见的病原RNA均无扩增反应;可以检测出10拷贝/μL的DHAV-3 RNA,其敏感性为RT-PCR的1 000倍;最低能够检测到相当于1.1个DELD50的DHAV-3;能够检测到人工感染雏鸭血清和病死鸭肝组织中的DHAV-3;上述结果表明该方法能够特异、灵敏、快速地检测DHAV-3,而且使用方便。
【作者单位】： 中国兽医药品监察所;
【基金】：国家微生物资源平台(NIMR-5)
【分类号】：S852.65
【正文快照】： 鸭病毒性肝炎是一种以快速传播为特点的雏鸭急性致死性传染病[1]。该病的病原为鸭甲型肝炎病毒(Duck hepatitis A virus,DHAV),分为1、2[2]和3[3]3个基因型[4]。在我国,同时存在DHAV-1和DHAV-3流行,给养鸭业造成了严重的经济损失。DHAV-1和DHAV-3在血清学上不能互相交叉中和,

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本文编号：1270555