豁眼鹅卵巢组织产蛋性能相关基因的筛选及表达分析

发布时间：2017-12-13 19:08

  本文关键词：豁眼鹅卵巢组织产蛋性能相关基因的筛选及表达分析

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【摘要】：本研究以辽宁豁眼鹅为试验对象,首先提取产蛋期和休产期的卵巢组织总RNA,利用Illumina HiSeq 2000高通量测序技术进行测序,筛选差异表达的基因,应用生物信息学技术对其功能进行预测性分析,然后扩增与卵巢生殖激素合成和分泌相关的3个基因：StAR、 CYP11A1, CYP19A1的部分片段。最后应用Real-Time PCR技术和Western blotting技术检测豁眼鹅产蛋周期不同阶段卵巢组织中3个基因的表达量变化情况,并通过生物信息学分析对其进行分析,以初步阐明StAR、 CYP11A1、CYP19A1 mRNA及蛋白表达水平与豁眼鹅产蛋性能之间的关系。试验结果如下：(1)成功筛选并鉴定出688个显著差异表达基因,其中344个上调基因和344个下调基因,这些基因主要参与类固醇类激素合成、促性腺激素释放激素信号通路、卵母细胞减数分裂、孕激素介导的卵母细胞成熟、类固醇合成、钙信号传导途径等生理过程。(2)成功获得豁眼鹅StAR、 CYP11A1、 CYP19A1基因部分目的片段,大小依次为449 bp、272 bp、 498 bp;相似性分析发现,豁眼鹅StAR基因与鸿雁和绿头鸭的相似性最高,分别为99%和94%；豁眼鹅CYPUA1基因与鸿雁的相似性是99%,绿头鸭是97%。豁眼鹅CYP19A1基因与鸿雁、绿头鸭的相似性是99%,与家鸡是93%。(3)产蛋周期不同阶段(3月份、5月份、8月份、11月份)StAR、 CYP11A1、 CYP19A1 mRNA的表达趋势均为先上升后下降,且均为5月份表达量显著高于其他月份,其中StAR、 CYP11A1 mRNA的表达量11月份最低,而CYP19A1则3月份最低；StAR、 CYPUA1、 CYP19A1 mRNA表达量在各月份之间差异显著。StAR、 CYP11A1、 CYP19A1三种蛋白表达量的变化趋势与对应的mRNA基本一致,均表现为先上升后下降。本研究表明,StAR、 CYP11A1、 CYP19A1等与生殖激素合成相关的基因在豁眼鹅产蛋周期不同阶段的卵巢组织中呈现出差异表达现象,并呈现一定的表达规律,推测其可能参与豁眼鹅产蛋和繁殖机能的调控。
【学位授予单位】：沈阳农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：S835

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