四川甘孜州藏鸡沙门氏菌的分离鉴定、耐药基因及可移动遗传元件的检测

发布时间：2017-12-21 08:05

本文关键词：四川甘孜州藏鸡沙门氏菌的分离鉴定、耐药基因及可移动遗传元件的检测　出处：《四川农业大学》2016年硕士论文　论文类型：学位论文

【摘要】：藏鸡主要分布在青藏高原海拔2200～4100 m的半农半牧区,是我国高海拔地区养鸡业的重要品种资源。藏鸡沙门氏菌病时有发生,耐药性日益突出,给藏鸡养殖业带来了极大的威胁。试验采集四川甘孜州4个藏鸡养殖场送检的28只疑似患沙门氏菌病藏鸡的心、肝、脾、肺、肾、卵巢(或睾丸)和肠内容物,总计196份样本,经细菌分离纯化、生化试验、PCR鉴定和血清型鉴定,共获得42株藏鸡沙门氏菌,其样本检出率为21.43%(42/196)。42株沙门氏菌共鉴定出6种血清型,其中鼠伤寒沙门氏菌(14株)、鸡伤寒沙门氏菌(10株)、鸡白痢沙门氏菌(8株)和肠炎沙门氏菌(6株)为主要的血清型。采用CLSI(2013)推荐的琼脂纸片扩散法(K-B)对42株藏鸡沙门氏菌进行21种抗菌药物的敏感性试验。结果表明,藏鸡沙门氏菌对21种抗菌药物均表现不同程度耐药。其中,对阿莫西林(90.48%)、羧苄西林(90.48%)的耐药率最高,其次为氨苄西林(88.10%)、利福平(88.10%)、复方新诺明(76.19%)、四环素(69.05%)、多西环素(59.52%)、氟苯尼考(54.76%)、头孢唑啉(47.62%)、卡那霉素(47.62%)和链霉素(42.86%),对庆大霉素(7.14%)、丁胺卡那(2.38%)的耐药率最低。41株分离菌对3类以上的抗菌药物耐药,多重耐药率为97.62%(41/42)。应用PCR技术对42株藏鸡沙门氏菌进行耐药基因检测。结果发现,分离株共检出26种耐药基因,其中β-内酰胺类耐药基因blaTEM、blaCTX-M、blaSHV、 blaOXA、blaPSE和blaCMY-2,以blaTEM检出率最高(90.48%)；氨基糖苷类耐药基因addA1、addA2、addB、AacC2、aac(3)-Ⅲ和Aph(3')-Ⅱa,以addA2检出率最高(85.71%)：四环素类耐药基因tetA、tetB、tetC,以tetA检出率最高(83.33%)：氯霉素类耐药基因catA1、floR、CmlA,以CmlA检出率最高(57.14%)；磺胺类耐药基因sull、su12,以su12检出率最高(83.33%)：喹诺酮类耐药基因qnrA、qnrB、 qnrS、aac(6')-Ib-cr、oqxA、oqxB,以aac(6')-Ib-cr检出率最高(59.52%)。应用PCR技术对41株藏鸡多重耐药沙门氏菌进行可移动遗传元件检测。结果共检出traA、trbC、merA、tnpA/Tn3、tnpU、tnp513、tn1721、IS26和intⅠ1 9种可移动遗传元件,其中traA、trbC为国内首次从沙门氏菌中检出。每株菌检出3-8种可移动遗传元件。通过质粒接合试验验证了多重耐药沙门氏菌中的耐药基因和可移动遗传元件具有可移动性。随机将14株检测到耐药基因和可移动遗传元件的多重耐药沙门氏菌进行质粒接合试验,结果共获得8株接合子,其接合成功率为57.14%(8/14)。结论：196份藏鸡样本中,沙门氏菌样本检出率为21.43%(42/196)；42株藏鸡沙门氏菌分离株共6种血清型,其中鼠伤寒沙门氏菌、鸡伤寒沙门氏菌、鸡白痢沙门氏菌和肠炎沙门氏菌为主要血清型：42株分离菌对21种抗菌药物均表现不同程度耐药,多重耐药率高达97.62%,且广泛携带耐药基因和可移动遗传元件,其耐药基因与可移动遗传元件之间存在某种相关性。
【学位授予单位】：四川农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：S852.61

【参考文献】

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