表面展示猪流行性腹泻病毒纤突蛋白S1的重组杆状病毒及其免疫效果研究

发布时间：2017-12-22 22:04

本文关键词：表面展示猪流行性腹泻病毒纤突蛋白S1的重组杆状病毒及其免疫效果研究　出处：《蚕业科学》2016年06期 　论文类型：期刊论文

【摘要】：猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)纤突蛋白S1能够介导宿主抵御PEDV感染的中和抗体的产生,是PEDV基因工程疫苗研究的重要靶抗原。将PEDV的S1基因克隆至杆状病毒基因组中,构建包含PEDV S1基因的重组杆状病毒,使S1蛋白表面展示表达。以该重组病毒作为活载体疫苗皮下接种BALB/c小鼠,验证S1蛋白在重组杆状病毒中的表达及其免疫原性。Western blotting分析被重组杆状病毒感染的Sf9细胞中,PEDV S1蛋白能有效表达且呈现大小分别约120 k D和150 k D的2条带,其中前者至少比预期大30 k D左右,推测重组S1蛋白在Sf9细胞中被高度糖基化修饰。重组杆状病毒的胶体金免疫电子显微镜观测结果显示S1蛋白展示于杆状病毒表面;间接ELISA试验结果证明重组杆状病毒可以诱导产生PEDV特异性抗体,抗体效价达到1∶5 000。血清中和试验及淋巴细胞增殖试验结果证明,该重组杆状病毒能够激发有效的体液免疫及细胞免疫反应,S1蛋白在重组杆状病毒表面展示表达并具有免疫原性。
【作者单位】：浙江理工大学生命科学学院;浙江省家蚕生物反应器和生物医药重点实验室;
【基金】：浙江省高校生物学重中之重学科开发基金项目(No.116-10331251507)
【分类号】：S852.65
【正文快照】： 猪感染猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diar- rhea virus,PEDV)引起的肠道传染性疫病的主要临床表现为水样腹泻、脱水、呕吐等,多发于冬季和早春季节,各年龄段猪均易感染,其中仔猪感病的致死率高达80%~100%[1-2]。自20世纪70年代在英国和比利时报道猪流行性腹泻(porcine

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