As2O3诱导鸡肝脏氧化应激和对MSRS的影响

发布时间：2017-12-25 16:04

  本文关键词：As2O3诱导鸡肝脏氧化应激和对MSRS的影响　出处：《华南农业大学》2016年硕士论文　论文类型：学位论文

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【摘要】：砷是一种类金属元素,在自然界中以无机砷和有机砷广泛存在于食物、饮水、地壳环境等中。砷暴露或过量吸收能导致多种疾病和病理损伤。目前氧化应激机制作为砷毒性的主要作用机理之一,认为活性氧(ROS)引起的生物大分子氧化损伤在砷毒性中起主要作用。甲硫氨酸亚砜还原酶(Msrs)是生物体内重要的氧化还原调节器,直接或间接参与氧化蛋白的修复和活性氧代谢调节,可能在砷导致的氧化应激毒性中起调控作用。为了探讨砷和Msrs之间的关系,通过建立鸡砷中毒的模型,并对相关的指标进行了检测。实验分成四组,每组1日龄鸡在第7d分别以0、1、3、9 mg/kg B.W.的剂量经口灌注三氧化二砷制剂5周;每天观察实验鸡的形态动作,并在第7 d、14 d、21 d、28d、35 d和42 d的体重进行记录。5周后对鸡进行处死,并迅速获取肝脏清洗干净并称重,用肝组织进行丙二醛(MDA)和总超氧化物歧化酶(T-SOD)进行检测以评估鸡肝的氧化应激状态,并检测肝组织甲硫氨酸亚砜还原酶基因和蛋白的表达。实验结果如下:1.通过每周对实验动物体重变化记录发现,低(1 mg/kg)、中(3 mg/kg)、高(9mg/kg)三个三氧化二砷攻毒剂量组的平均体重均比空白组小;与此同时,除低剂量组中的肝脏指数和空白对照组没有明显变化外(P0.05),中剂量组和高剂量组的肝脏均比空白对照组重,且差异极显著(P0.01)。2.试剂盒检测MDA和T-SOD,在肝脏组织中,MDA均随着剂量的增大而显著升高(P0.01),相反T-SOD活力出现明显下降的趋势(P0.01)。3.通过使用荧光定量PCR法(Real-time PCR)检测甲硫氨酸亚砜还原酶A(MsrA)、甲硫氨酸亚砜还原酶B1(MsrB1)和甲硫氨酸亚砜还原酶B3(MsrB3)mRNA表达情况,发现三者的表达随三氧化二砷剂量增加而增加(P0.01)。4.蛋白印迹法(Western Blot)法检测MsrA和MsrB1蛋白表达情况,发现MsrB1的蛋白含量随着三氧化二砷的剂量增加而上升(P0.01),但三氧化二砷也会下调MsrA的蛋白量(P0.01和P0.05)。实验结果表明,各剂量组三氧化二砷(1 mg/kg、3 mg/kg、9 mg/kg)可使鸡生长迟缓,且中、高剂量组均造成肝脏重量上升;提高甲硫氨酸亚砜还原酶的基因的表达,并对其蛋白表达出现差异变化。由此我们认为三氧化二砷会诱导鸡肝脏的氧化应激,并影响肝脏甲硫氨酸亚砜还原酶的表达。
【学位授予单位】：华南农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：S858.31

【参考文献】

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本文编号：1333488