猪白细胞介素17A基因的克隆与鉴定

发布时间：2018-01-28 12:33

  本文关键词： 猪白细胞介素A 基因 克隆 鉴定　出处：《基因组学与应用生物学》2017年11期 　论文类型：期刊论文

【摘要】：猪白细胞介素17A(IL-17A)是猪白介素17家族的重要成员,在猪体内发挥重要作用的细胞因子。本研究将猪的外周血单核细胞分离后,用Con A刺激22 h后提取细胞的总RNA,RT-PCR方法扩增出猪IL-17A基因,将其PCR产物回收纯化克隆至p MD-18T载体上,转化至大肠杆菌DH5α,PCR和双酶切鉴定筛选阳性重组克隆质粒。结果显示,筛选的重组克隆质粒为阳性克隆质粒,基因片段为目的基因。克隆获得的猪IL-17A基因的序列与Gen Bank上公布的猪IL-17A基因序列同源性高,为99.4%。本研究成功克隆了IL-17A基因,有助于研究其在猪病毒性疾病中的作用。
[Abstract]:Porcine interleukin-17 (SIL-17A) is an important member of the porcine interleukin-17 family, which plays an important role in swine. In this study, porcine peripheral blood monocytes were isolated. The porcine IL-17A gene was amplified by RT-PCR after 22 h stimulation with Con A, and its PCR product was purified and cloned into p MD-18T vector. The recombinant plasmid was transformed into E. coli DH5 伪 -PCR and identified by double enzyme digestion. The results showed that the selected recombinant clone plasmid was positive clone plasmid. The cloned porcine IL-17A gene has high homology with the porcine IL-17A gene published on Gen Bank. IL-17A gene was cloned successfully, which is helpful to study its role in porcine viral diseases.
【作者单位】： 新乡学院生命科学技术学院新乡学院生物技术研究中心;河南科技学院;
【基金】：国家自然基金(31272539) 新乡学院科技创新基金(12ZA04);新乡学院科技创新团队项目(XXUTD20170106;XXUTD20170107)共同资助 2015年河南省教育技术装备和实践教育研究立项课题(No.GZS095)
【分类号】：S858.28
【正文快照】： *通讯邮箱,wangxuannian@163.comCloning and Identification of Porcine IL-17A GeneHe Yong1Zhu Yanping1Yue Feng1Li Peng1Sun Guopeng1Zhang Yanfang1Xing Ruilin1Li Run-zhi1,2Yang Jian1Yang Chuan1Wang Xuannian1,21 Bio-technology Centre,School of Life Science,Xin

【相似文献】

相关期刊论文 前10条

1 刘明莉;夏平安;党占国;王中明;邱璜;卢高峰;李伟娟;;SOE-PCR法检测PRRSV ORF5缺失跨膜区的融合蛋白基因片段的研究[J];黑龙江畜牧兽医;2009年05期

2 刘彦威,刘娜;白细胞介素的功能及临床应用[J];中国兽医科技;1992年12期

3 马德星,李广兴,胡京友;白细胞介素15的研究进展[J];黑龙江畜牧兽医;2003年12期

4 李庆章;刘忠贵;;白细胞介素[J];中国畜禽传染病;1990年04期

5 韩文瑜;白细胞介素[J];中国兽医科技;1987年08期

6 刘学芹,龚炎长,喻传洲,沈世学;鸡OVR基因的一个片段PCR扩增克隆与鉴定[J];中国家禽;2000年07期

7 金红,李祥瑞,李涛,于康震,卢景良;重组牛白细胞介素-2的高效表达及其生物学活性的测定[J];中国免疫学杂志;1998年04期

8 金红，李祥瑞，卢景良，王秀丽;重组牛白细胞介素－2对不同种属动物淋巴细胞的作用[J];中国兽医学报;1995年04期

9 安星兰;薛超;朴善花;苗向阳;滕春波;安铁洙;王春生;;小鼠MSTN基因RNA干涉载体的构建及干涉效率的检测[J];黑龙江畜牧兽医;2012年07期

10 马德星,李广兴;白细胞介素-15研究进展[J];吉林畜牧兽医;2004年07期

相关会议论文 前8条

1 姜文博;单安山;孙进华;;鸡白细胞介素18基因的克隆及表达[A];中国畜牧兽医学会动物营养学分会第十次学术研讨会论文集[C];2008年

2 赵增阳;习欠云;张志岐;王瑞晓;江青艳;张永亮;;猪SSTR5胞外区Ⅱ环基因片段的原核表达与纯化[A];全国动物生理生化第十一次学术交流会论文摘要汇编[C];2010年

3 张旭;张春杰;程相朝;李银聚;吴庭才;郁川;王学强;冯运巩;;卢氏鸡白细胞介素21的克隆与生物信息学分析[A];中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第十六次学术研讨会、中国病理生理学会动物病理生理专业委员会第十五次学术研讨会论文集[C];2009年

4 王彦;杨岭;刘益平;朱庆;;鸡FATP4基因片段的分子克隆及其表达[A];中国畜牧兽医学会2008年学术年会暨第六届全国畜牧兽医青年科技工作者学术研讨会论文集[C];2008年

5 张旭;张春杰;程相朝;李银聚;吴庭才;郁川;王学强;冯运巩;;卢氏鸡白细胞介素21的克隆与生物信息学分析[A];中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会论文集（下册）[C];2009年

6 严琳;陈焕春;;猪白细胞介素2(IL-2)与白细胞介素6(IL-6)作为疫苗佐剂的研究进展[A];猪的重要传染病防治研究新成果——中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第五届理事会第二次全体会议暨防检疫专业委员会第7次学术交流会论文集[C];2002年

7 严琳;牟帆;陈焕春;;重组猪白细胞介素2对伪狂犬病疫苗的佐剂效应研究[A];中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会成立20周年庆典暨第十次学术研讨会论文集（上）[C];2003年

8 王彤彤;吕军华;吴海珍;周恩民;肖一红;;猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF-6基因片段的真核表达[A];2012年中国畜牧兽医学会兽医病理学分会暨中国病理生理学会动物病理生理专业委员会学术研讨会论文集[C];2012年

相关博士学位论文 前3条

1 李敏;牛免疫球蛋白重链基因中JH，Eμ片段敲除的研究和JH，Cμ基因的分析[D];中国农业大学;2005年

2 袁建霞;利用荧光原位杂交技术进行鸡功能基因的物理定位及其比较基因组学研究[D];中国农业大学;2004年

3 卫娜;鹅白细胞介素2受体α链与白细胞介素18特性的初步研究[D];东北农业大学;2011年

相关硕士学位论文 前9条

1 马军德;小鼠Zfy基因RNAi病毒载体的构建及性控效果的观察[D];石河子大学;2013年

2 阎富龙;猪源新城疫病毒JL02/2000株全基因分析和NP、P基因的克隆[D];吉林农业大学;2014年

3 廖艳;长毛兔白细胞介素-4（IL-4）基因克隆及真核表达[D];四川农业大学;2008年

4 李德贵;犬主要行为性状及其相关基因的研究[D];华中农业大学;2007年

5 张旭;卢氏鸡主要白细胞介素的克隆分析与IL-21的原核表达[D];河南科技大学;2010年

6 徐兴超;猪的转腺苷一磷酸脱氨酶1基因细胞系的制备[D];东北农业大学;2011年

7 郑晶;獭兔白细胞介素-2（IL-2）基因克隆及真核表达[D];四川农业大学;2008年

8 朱世康;鸡FADS2基因5’端SNP鉴定及启动子功能分析[D];河南农业大学;2013年

9 弓莉;鸡TLR7基因片段的克隆及在鸡IBDV感染下的半定量RT-PCR检测[D];第一军医大学;2006年

，

本文编号：1470775